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Cyanine5 DBCO品牌:MedChemExpress (MCE)
货号:HY-D1583
CAS:2360411-64-7
Synonyms:DBCO-Cy5
Cyanine5 dibenzocyclooctyne
纯度:99.65%
存储条件:-20°C,避光,氮气保存 *溶剂中:-80°C,6 个月
-20°C,1 个月(避光,氮气保存)
运输条件:美国大陆的室温
其他地方可能有所不同。
产品活性:Cyanine5 DBCO (DBCO-Cy5) 是一种低毒的叠氮化物反应探针 (近红外荧光染料),可通过无铜"点击反应"对叠氮化物标记的生物分子进行成像 (Ex=635 nm, Em=650-700 nm)。Cyanine5 DBCO 无明显的细胞和动物毒性,并且不影响靶细胞 (叠氮化标记细胞) 以外的其他细胞的生理功能。Cyanine5 DBCO 可用于体内外细胞的标记和追踪。
生物活性:Cyanine5 DBCO (DBCO-Cy5) 是一种水溶性低毒性叠氮化物反应性探针(NIR 荧光染料),用于通过无铜"点击"反应对叠氮化物标记的生物分子进行成像。 Cyanine5 DBCO 没有明显的细胞毒性或动物毒性,对靶细胞(叠氮化物标记细胞)以外的细胞的生理功能没有损害。 Cyanine5 DBCO 可用于体外和体内标记和跟踪细胞(Ex=635 nm,Em=650-700 nm)[1][2]. In Vitro: Guidelines(以下是我们推荐的方案。此方案仅提供一个指南,应根据您的具体需求进行修改)。
细胞标记(例如 A549 细胞)[1][2]:
1. 将细胞以 3×10< 的密度接种到 35-mm 玻璃底培养皿上sup>4(因细胞而异)在 2 mL 生长培养基中。
2. 添加 Ac4ManNAz(50 μM,终浓度),孵育 3 天< /b>(在细胞表面生成叠氮基团)。
3. 用 DPBS (pH 7.4) 洗涤细胞两次。
4. 用 Cyanine5 DBCO (20 μM, final concentration) for 1 h at 37℃。
5. DPBS (pH 7.4) 冲洗细胞并用甲醛-戊二醛联合固定剂固定15 min at 25℃。
6. 用DPBS (pH 7.4)洗涤细胞两次,用DAPI染色细胞以标记细胞核。
7. 测量Cyanine5 DBCO荧光(Ex=635 nm,Em=650-700 nm)使用共聚焦激光扫描显微镜。
注意:
1) Ac4ManNAz 处理后,Cyanine5 DBCO 可靶向细胞表面人工引入的叠氮基超过 3 天。
2) Cyanine5 DBCO 标记的程度呈剂量依赖性方式。 In Vivo: Guidelines(以下是我们推荐的方案。此方案仅提供一个指南,应根据您的具体需求进行修改)。
Cell tracking in vivo[1][2]:
1. 将种子细胞以 3×104< 的密度接种到 35 毫米玻璃底培养皿上/sup>(因细胞而异)在 2 mL 生长培养基中。
2. 添加 Ac4ManNAz(50 μM,终浓度),孵育 3 天 (在细胞表面产生叠氮基团)。
3. 用DPBS(pH 7.4)洗涤细胞两次。
4. 小鼠麻醉,然后将细胞(Ac4ManNAz处理后)注射到左叶
5. 将 Cyanine5 DBCO (25 μM, 200 μL) 注入尾静脉(细胞注入肝脏后3 天)。
6. 测量 Cyanine5 DBCO 荧光(Ex=635 nm,Em=650-700 nm)。体内近红外荧光 (NIRF) 图像是通过体内成像系统获得的。
体外:指南 (以下是我们推荐的方案。此方案仅提供指南,应根据您的具体需要进行修改)。 细胞标记 (例如A549细胞)[5][2]: 1. 将 2 mL 生长的种子细胞以 3×104 (因细胞而异) 的密度接种到 35 毫米玻璃底培养皿中 2. 加入Ac4ManNAz (50 μM,终浓度),孵育3天 (在细胞表面产生叠氮基团)。 3. 用 DPBS (pH 7.4) 洗涤细胞两次。 4. 用 Cyanine5 DBCO (20 μM,终浓度) 在 37℃孵育细胞 1 h℃。 5. DPBS (pH 7.4) 冲洗细胞,甲醛-戊二醛联合固定液25℃固定15 min。 6. DPBS 洗涤细胞两次 (pH 7.4) 并用 DAPI 染色细胞以标记细胞核。 7. 使用共聚焦激光扫描显微镜测量 Cyanine5 DBCO 荧光 (Ex=635 nm,Em=650-700 nm)。 注意: 1) 在用 Ac4ManNAz 处理后,Cyanine5 DBCO 可以靶向细胞表面人工引入的叠氮基团超过 3 天。 2) 程度Cyanine5 DBCO 标记具有剂量依赖性。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。
体内:指南 (以下是我们推荐的方案。此方案仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改)。体内细胞追踪[1][2]: 1. 将含有 2 mL 生长培养基的种子细胞以 3×104 (因细胞而异) 的密度接种到 35 毫米玻璃底培养皿上。 2. 加入Ac4ManNAz (50 μM,终浓度),孵育3天 (在细胞表面产生叠氮基团)。 3. 洗涤用 DPBS (pH 7.4) 对细胞进行两次处理。 4. 对小鼠进行麻醉,然后将细胞 (经过 Ac4ManNAz 处理后) 注入肝左叶。 5. 注入 Cyanine5 DBCO (25 μM,200 μL) 到尾静脉 (3 天 将细胞注射到肝脏后)。 6. 测量 Cyanine5 DBCO 荧光 (Ex=635 nm,Em=650-700 nm)。体内近红外荧光 (NIRF) 图像是通过体内成像系统获得的。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
Emission (Em):668
Excitation (Ex):647