RIP 抗体 (YA091)

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RIP Antibody (YA091) 是一个兔来源、无偶联标记、抗 RIP 的 IgG 单克隆抗体。

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WB: 蛋白质免疫印迹;
IHC-P: 石蜡切片样本的免疫组织化学;
IHC-F: 冰冻切片样本的免疫组织化学;
ICC/IF: 细胞免疫荧光;
IF-Tissue: 组织免疫荧光;
mIHC: 多重荧光免疫组化;
IP: 免疫沉淀;
ChIP: 染色质免疫沉淀;
FC: 流式细胞术;
ELISA: 酶联免疫吸附试验

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描述

RIP Antibody (YA091) is a Rabbit-derived and non-conjugated IgG monoclonal antibody, targeting to RIP.

宿主

Rabbit

克隆性

Recombinant,Monoclonal

分子量

Predicted band size: 76 kDa;

Observed band size: 76 kDa

请注意：因蛋白存在修饰或聚体等情况，以实测为准，预测仅为参考。

反应种属

Human

蛋白数据库

Q13546

基因 ID

8737 [NCBI]

免疫原

Synthetic peptide corresponding to Human RIP.AA range:250-500.

应用 & 推荐
稀释比例

应用	稀释比
WB WB: 蛋白质免疫印迹	1:500-1:1000
FC FC: 流式细胞术	1:50

敏感性	Endogenous	纯度	Protein A affinity purified.
偶联	Non-conjugated	修饰	Unmodified
同型	IgG

性状

液体

组分

Supplied in 1*TBS (pH7.4), 0.05% BSA and 40% Glycerol. Preservative: 0.05% Sodium Azide.

保存条件 & 期限

Stored at -20°C for 1 year. Avoid repeated freeze / thaw cycles.

运输条件

Shipping with blue ice.

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Western blot analysis of extracts from Hela (lane 1) and M-heart (lane 2) and RAW264.7 (lane 3) using RIP antibody. Proteins were transferred to a PVDF membrane and blocked with 5% nonfat powdered milk in PBST for 2 hour at room temperature. The primary antibody (1/1000) and Loading control antibody (GAPDH, 1/3000) was diluted with 5% nonfat powdered milk in PBST at 4°C overnight. Goat Anti-Rabbit IgG-HRP Secondary Antibody (1/8,000) was incubated for 45min at room temperature.

背景

功能：丝氨酸/苏氨酸激酶是 TNF 介导的细胞凋亡、坏死性凋亡和炎症通路的关键调节因子 (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280, PubMed:31827281, PubMed:32657447, PubMed:35831301)。它具有依赖于激酶活性的功能，调节细胞死亡；同时还具有不依赖于激酶活性的支架功能，调节炎症信号传导和细胞存活 (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439, PubMed:30988283)。 RIPK1 具有不依赖于激酶活性的支架蛋白功能：当 TNF 与 TNFR1 结合后，RIPK1 被募集到 TNF-R1 信号复合物 (TNF-RSC，也称为复合物 I) 中，在那里它作为支架蛋白促进细胞存活，部分是通过激活经典的 NF-κB 通路实现的 (基于相似性)。RIPK1 的激酶活性对于调节坏死性凋亡和细胞凋亡这两种平行的细胞死亡形式至关重要：RIPK1 的蛋白激酶活性被激活后，它调节两种死亡诱导复合物的组装，即驱动细胞凋亡的复合物 IIa (RIPK1-FADD-CASP8) 和驱动坏死性凋亡的复合物 IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL)(基于相似性)。RIPK1 是限制 CASP8 依赖的 TNFR1 诱导的细胞凋亡所必需的 (基于相似性)。在正常情况下，RIPK1 抑制 RIPK3 依赖性坏死性凋亡，该过程由复合物 IIb 的 RIPK3 组分介导，后者在 ZBP1 诱导下催化 MLKL 的磷酸化 (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439, PubMed:30988283)。RIPK1 通过 FADD 介导募集 CASP8 来抑制 RIPK3 介导的坏死性凋亡，CASP8 可切割 RIPK1 并限制 TNF 诱导的坏死性凋亡 (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439, PubMed:30988283)。在胚胎发育过程中，抑制细胞凋亡和坏死性凋亡至关重要：其作用机制是通过阻止 TRADD 与 FADD 的相互作用，从而限制 CASP8 的异常激活 (基于相似性)。除细胞凋亡和坏死性凋亡外，该蛋白还参与炎症反应，促进促炎细胞因子 (如白细胞介素-6 (IL-6)) 的转录生成 (PubMed:31827280, PubMed:31827281)。该蛋白可磷酸化 RIPK3：RIPK1 和 RIPK3 之间存在相互的自身磷酸化和反式磷酸化 (PubMed:19524513)。以 TNF-α依赖的方式磷酸化 DAB2IP 的 Ser-728 位点，从而激活 MAP3K5-JNK 凋亡级联反应 (PubMed:15310755, PubMed:17389591)。是 DNA 损伤后 ZBP1 诱导的 NF-κB 激活所必需的 (基于相似性)。

亚细胞定位：细胞质；细胞膜

异构体 & 翻译后修饰：Q13546 有两种异构体：Q13546-1：75931 Da (预测值)；Q13546-2：70733 Da (预测值)。
(微生物感染) 在 RIP 同型相互作用基序 (RHIM) 内，Q13546 可被弗氏志贺氏菌 OspD3 蛋白水解切割，导致其降解并抑制坏死性凋亡；在 Asp-324 位点，Q13546 可被 CASP8 蛋白水解切割 (PubMed:10521396, PubMed:31827280, PubMed:31827281)。该切割对于限制 TNF 诱导的细胞凋亡、坏死性凋亡和炎症反应至关重要 (PubMed:31827280, PubMed:31827281)。 RIPK1 的切割可抑制 NF-κB 的激活，并增强 TRADD 与 FADD 的相互作用 (PubMed:10521396)。在内源性细胞凋亡过程中，RIPK1 会被 CASP6 蛋白水解切割 (PubMed:22858542)；RIPK1 和 RIPK3 之间会发生相互的自身磷酸化和反式磷酸化 (PubMed:18408713, PubMed:19524513, PubMed:31827280)。RIPK3 对 Ser-161 位点的磷酸化是坏死性凋亡诱导复合物形成所必需的 (PubMed:18408713)。Ser-25 位点的磷酸化会抑制其激酶活性，从而阻止 TNF 介导的 RIPK1 依赖性细胞死亡 (PubMed:30988283)。 MAP3K7 在 Ser-320 位点磷酸化 RIPK1，该磷酸化需要 BIRC2/c-IAP1 和 BIRC3/c-IAP2 先用 Lys-63 连接的泛素链对其进行泛素化 (基于相似性)。这种磷酸化正向调控 RIPK1 与 RIPK3 的相互作用，从而促进坏死性凋亡；但负向调控 RIPK1 激酶活性及其与 FADD 的相互作用，从而介导细胞凋亡 (基于相似性)；USP7 去泛素化；这种修饰是 TNF-α诱导细胞凋亡所必需的；它被 Lys-11、Lys-48、Lys-63 和线性连接的泛素链泛素化 (PubMed:15258597, PubMed:16603398, PubMed:17703191, PubMed:18450452, PubMed:21455173, PubMed:21931591, PubMed:29883609, 参考文献 35)。TRAF2 介导的 Lys-63 连接链的多聚泛素化可诱导其与 IKK 复合物结合 (PubMed:15258597)。 TNFAIP3 介导的 Lys-63 连接链的去泛素化和 Lys-48 连接链的多聚泛素化导致 RIPK1 蛋白酶体降解，进而下调 TNF-α诱导的 NF-κB 信号通路 (PubMed:15258597)。RFFL 或 RNF34 介导的 Lys-48 连接多聚泛素化也促进蛋白酶体降解，并负调控 TNF-α诱导的 NF-κB 信号通路 (PubMed:18450452，参考文献 35)。线性多聚泛素化；头尾相连的线性多聚泛素化 (Met-1 连接) 由 LUBAC 复合物介导，并降低蛋白激酶活性 (PubMed:21455173)。 CYLD 对线性多聚泛素的去泛素化促进激酶活性 (基于相似性)。BIRC2/c-IAP1 和 BIRC3/c-IAP2 介导的 Lys-48 和 Lys-63 连接链的多聚泛素化导致 NF-κB 的激活 (PubMed:21931591)。PELI1 介导的 Lys-63 连接链的多聚泛素化 (PubMed:29883609)。BIRC2/c-IAP1 和 BIRC3/c-IAP2 介导的 Lys-377 位点 Lys-63 连接链的多聚泛素化对于 MAP3K7 介导的 Ser-320 位点的磷酸化至关重要 (基于相似性)。这种泛素化是 NF-κB 激活所必需的，它抑制 RIPK1 激酶活性，并在胚胎发育过程中防止细胞死亡方面发挥关键作用 (基于相似性)；(微生物感染) 肠致病性大肠杆菌蛋白 NleB1 在 Arg-603 位点进行糖基化：精氨酸 GlcNAc 糖基化可阻止同型/异型死亡结构域相互作用

亚基：同源二聚体 (PubMed:29440439, PubMed:29681455)。通过 RIP 同型相互作用基序与 RIPK3 相互作用 (通过 RIP 同型相互作用基序)；这种相互作用诱导 RIPK1 磷酸化并形成 RIPK1-RIPK3 坏死诱导复合物 (PubMed:10358032, PubMed:11734559, PubMed:19524512, PubMed:29681455, PubMed:29883609)。在 TNF 诱导的坏死中，RIPK1-RIPK3 二聚体进一步与 PGAM5 和 MLKL 相互作用；该复合物的形成导致 PGAM5 磷酸化并增加 PGAM5 磷酸酶活性 (PubMed:22265414)。通过死亡结构域与 TNFRSF6 (通过死亡结构域) 和 TRADD (通过死亡结构域) 相互作用 (PubMed:8612133)。在 TNF 依赖性过程中，TRADD 将其募集至 TNFRSF1A (PubMed:24130170)。结合 RNF216、EGFR、IKBKG、TRAF1、TRAF2 和 TRAF3 (PubMed:11116146, PubMed:11854271, PubMed:8612133, PubMed:9927690)。与 BNLF1 相互作用 (PubMed:10409763)。在 TNF-α刺激下与 SQSTM1 相互作用 (PubMed:10356400)。可能与 MAVS/IPS1 相互作用 (PubMed:16127453)。与 ZFAND5 相互作用 (PubMed：14754897)。与 RBCK1 相互作用 (PubMed：17449468)。与 ZBP1 相互作用 (基于相似性)。与 BIRC2/c-IAP1、BIRC3/c-IAP2 和 XIAP/BIRC4 相互作用 (PubMed：21931591)。通过激酶结构域与 DAB2IP (通过 Ras-GAP 结构域) 相互作用；该相互作用以 TNF-α 依赖的方式发生 (PubMed：15310755，PubMed：17389591)。与 ARHGEF2 相互作用 (PubMed：21887730)。通过蛋白激酶结构域与 RFFL 相互作用；参与 RIPK1 的泛素化 (PubMed：18450452)。与 RNF34 相互作用；参与 RIPK1 泛素化 (参考文献 35)。与 TICAM1 相互作用，且在 WDFY1 存在下该相互作用增强 (PubMed:25736436)。与 PELI1 相互作用 (PubMed:29883609)。通过死亡结构域与 CRADD 相互作用；该相互作用是直接的 (PubMed:9044836)。至少由 RIPK1、FADD 和 CASP8 组成的复合物 IIa 的组成部分 (基于相似性)。AIM2 PANoptosome 复合物的组成部分，该复合物是一种驱动炎症细胞死亡 (PANoptosis) 的多蛋白复合物 (基于相似性)。与 MAP3K7、CFLAR、CASP8、FADD 和 NEMO 相互作用 (基于相似性)。与 TAX1BP1 相互作用；该相互作用负调控 RIPK1 的泛素化 (PubMed:17703191)。与 GRB2 相互作用 (PubMed:35831301)。与 DDX24 相互作用；该相互作用破坏 RLR 信号通路对 IFN 依赖性转录因子 IRF7 的激活 (PubMed:24204270)。

RRID

AB_3102420

反应种属数据库

Entrez Gene: 8737 Human

SwissProt: Q13546 Human

OMIM: 618108 Human

研究领域

Cell Biology

中文名

RIP 抗体

同用名

RIP1, RIPK1, Receptor-Interacting Protein Kinase 1

文件资料

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Data Sheet (443 KB) SDS (251 KB)

COA (193 KB)

抗体使用指南 (1083 KB)

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Help & FAQs

Do most proteins show cross-species activity?
Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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