Calcein-AM (solution) 

Calcein AM (solution) , has cell membrane permeability and can easily enter the cell. Calcein AM has no fluorescence and is hydrolyzed by endogenous esterase in the cell to produce polar molecule Calcein (Calcein) , which has strong negative charge and cannot permeate the cell membrane. Calcein can emit strong green fluorescence, so it is often used with Propidium Iodide for cell viability/virulence detection, excitation/emission wavelength: 494/515 nm^[1].
Solvent and concentration: DMSO: 2 mM

使用方法
1.Calcein AM 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，可根据实际情况稀释相应的储备液。注意，如果溶剂为 DMSO，则必须考虑 DMSO 的细胞毒性，并应制备溶剂对照；如果溶剂为纯水，则工作液在加入细胞前需要过滤并除菌。
注：请根据实际情况调整 Calcein AM 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色 (悬浮细胞)
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10⁶/mL。
2.2 加入 1 mL Calcein AM 工作液，37°C 孵育 30-45 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色 (贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，37°C 孵育 30-45 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或荧光酶标检测仪进行观察。

保存条件
分装保存，避免反复冻融，-20°C 避光保存

注意事项
1. 请根据实际情况调整 Calcein AM 工作液浓度与孵育时间。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Calcein-AM 被发现适用于体内研究，因为它对细胞功能没有有害影响，而且确实是细胞活力的标志物^[2]。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

994.87

C₄₆H₄₆N₂O₂₃

148504-34-1

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

• [1]. Wang XM, et al. A new microcellular cytotoxicity test based on calcein-AM release. Hum Immunol. 1993 Aug;37(4):264-70.  [Content Brief]

  [2]. Braut-Boucher F, et al. A non-isotopic, highly sensitive, fluorimetric, cell-cell adhesion microplate assay using calceinAM-labeled lymphocytes. J Immunol Methods. 1995 Jan 13;178(1):41-51.  [Content Brief]

  [3]. Bratosin D, et al. Novel fluorescence assay using calcein-AM for the determination of human erythrocyte viabilityand aging. Cytometry A. 2005 Jul;66(1):78-84.  [Content Brief]

  [4]. Holló Z, et al. Calcein accumulation as a fluorometric functional assay of the multidrug transporter. Biochim Biophys Acta. 1994 May 11;1191(2):384-8.  [Content Brief]