RhoNox-1 (solution) 

RhoNox-1 (solution) is a fluorescent probe for the specific detection of divalent iron ions, and when RhoNox-1 reacts with Fe²⁺. RhoNox-1 can generate an irreversible orange (red) fluorescent product (Ex/Em：540/575 nm). FeRhoNox-1 can enter the cell well, suitable for the detection of Fe²⁺ in living cells, and tends to be localized in the Golgi apparatus^[1].
Solvent and concentration: DMSO: 5 mM

1. RhoNox-1 工作液的配制
1.1 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，可根据实际情况稀释相应的储备液。注意，如果溶剂为 DMSO，则必须考虑 DMSO 的细胞毒性，并应制备溶剂对照；如果溶剂为纯水，则工作液在加入细胞前需要过滤并除菌。
注：请根据实际情况调整 RhoNox-1 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色 (悬浮细胞)
2.1 悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在1×10⁶/mL
2.2 加入 1 mL工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色 (贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，室温孵育5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟 ，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

458.56

C₂₈H₃₀N₂O₄

1447815-38-4

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

• [1]. Mukaide T, et al. Histological detection of catalytic ferrous iron with the selective turn-on fluorescent probe RhoNox-1 in a Fenton reaction-based rat renal carcinogenesis model. Free Radic Res. 2014 Sep;48(9):990-5.  [Content Brief]

  [2]. Jamnongkan W, et al. Upregulation of transferrin receptor-1 induces cholangiocarcinoma progression via induction of labile iron pool. Tumour Biol. 2017 Jul;39(7):1010428317717655.  [Content Brief]

  [3]. Ito F, et al. Contrasting intra- and extracellular distribution of catalytic ferrous iron in ovalbumin-induced peritonitis. Biochem Biophys Res Commun. 2016 Aug 5;476(4):600-606.  [Content Brief]