SM-102 (GMP Like) 

SM-102 (GMP Like) is SM-102 (HY-134541) produced by using GMP like guidelines. GMP Like small molecules works appropriately as an auxiliary reagent for cell therapy manufacture. SM-102 is an amino cationic lipid useful in the formation of lipid nanoparticles (LNPs). SM-102 has higher transfection efficiency. SM-102 plays an important role in the effectiveness of lipid nanoparticles (LNPs) in delivering mRNA therapeutics and vaccines^[1][2].

脂质纳米粒子的制备^[3][4]

我们在此提供 FDA 批准的 mRNA-1273（一种 COVID-19 mRNA 疫苗）中 LNP 的脂质摩尔比。此配方中的脂质摩尔比为 SM-102：DSPC：胆固醇：DMG-PEG 2000 =50 : 10 : 38.5 : 1.5^[1]，RNA 与脂质的重量比为 0.05 (wt/wt)。

A. 脂质混合物的制备

1. 将脂质溶解于乙醇中，配制成 10 mg/mL 的储备溶液。脂质储备溶液可储存于 -20°C 以备后用。

注 1： 可电离脂质通常是液体。由于其粘度，应始终称重，而不是依赖自动移液器的体积。

注意事项2：胆固醇溶液需保温 (>37°C) 以保持流动性。应及时转移胆固醇溶液，避免冷却。

2. 按照说明制备脂质混合物溶液。每毫升脂质混合物添加以下物质：572 μL 10 mg/mL SM-102 (HY-134541)、240 μL 10 mg/mL 胆固醇 (HY-N0322)、127 μL 10 mg/mL DSPC (HY-W040193) 和 61 μL DMG-PEG 2000 (HY-112764)。充分混合溶液以获得澄清溶液。此混合物含有 10 mg 总脂质。

注 3：脂质和比例的选择可以根据需要进行改变，这将影响 LNP 特性 (大小、多分散性和功效) 以及所需的 mRNA 量。

B. mRNA 制备

1. 用 100 mM pH 5 醋酸钠缓冲液制备 166.7 μg/mL mRNA 溶液。

注 4：脂质：mRNA 重量比影响包封效率。可制备其他重量比作为替代配方，用户应进行相应调整。

C. 混合

实现溶液快速混合的常用方法有三种：移液器混合法、涡旋混合法和微流体混合法。所有这些混合方法都可用于各种应用。

值得注意的是，移液器混合法和涡旋混合法可能会产生更多异质性 LNP，包封效率较低，并且容易产生变异。微流体装置能够以高度可控、可重复的方式快速混合，从而实现均质 LNP 和高包封效率。在这些装置中，乙醇脂质混合物和水溶液在单独的流中快速混合。当两股流混合时形成 LNP，然后收集到单个收集管中。

1. 移液器混合方法：

1.1. 吸取 3 mL mRNA 溶液，快速加入 1 mL 脂质混合物溶液中（一般采用 1:3 的乙醇脂质混合物与水性缓冲液比例）。快速上下移液 20-30 秒。

1.2. 将所得溶液在室温下孵育最多 15 分钟。

1.3. 混合后，将 LNPs 用 PBS (pH 7.4) 透析 2 小时，用 0.2 μm 过滤器无菌过滤，并在 4°C 下储存。

2. 涡旋混合法：

1.1. 在涡旋混合器上以中等速度涡旋 3 mL mRNA 溶液。然后，快速将 1 mL 脂质混合物溶液加入涡旋溶液中（通常使用 1:3 的乙醇脂质混合物与水性缓冲液的比例）。继续涡旋所得分散液 20-30 秒。

1.2. 将所得溶液在室温下孵育最多 15 分钟。

1.3. 混合后，将 LNPs 用 PBS (pH 7.4) 透析 2 小时，用 0.2 μm 过滤器无菌过滤，并在 4°C 下储存。

3. 微流体混合方法：

1.1 将 3 mL mRNA 缓冲液与 1 mL 脂质混合物溶液在微流控装置中以 12 mL/min 的总流速混合（一般采用 1:3 的乙醇脂质混合物与水性缓冲液的比例）。

注 5：可以改变流量比和总流量等参数来微调 LNP。

1.2. 混合后，将 LNPs 用 PBS (pH 7.4) 透析 2 小时，用 0.2 μm 过滤器无菌过滤，并在 4°C 下储存。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

710.17

C₄₄H₈₇NO₅

2089251-47-6

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

• [1]. Escalona-Rayo O, et al. In vitro and in vivo evaluation of clinically-approved ionizable cationic lipids shows divergent results between mRNA transfection and vaccine efficacy. Biomed Pharmacother. 2023 Sep;165:115065.  [Content Brief]

  [2]. Cho HY, et al. Effective Perturbations on the Amplitude and Hysteresis of Erg-Mediated Potassium Current Caused by 1-Octylnonyl 8-[(2-hydroxyethyl)[6-oxo-6(undecyloxy)hexyl]amino]-octanoate (SM-102), a Cationic Lipid. Biomedicines. 2021 Oct 1;9(10):1367.  [Content Brief]

  [3]. Mashima R, et al. Lipid Nanoparticles: A Novel Gene Delivery Technique for Clinical Application. Curr Issues Mol Biol. 2022 Oct 19;44(10):5013-5027.  [Content Brief]

  [4]. McKenzie RE, et al. mRNA Synthesis and Encapsulation in Ionizable Lipid Nanoparticles. Curr Protoc. 2023 Sep;3(9):e898.  [Content Brief]