TMA-DPH (solution) 

TMA-DPH (solution) is a hydrophobic fluorescent membrane probe (Ex=355 nm; Em=430 nm). TMA-DPH is able to anchor on the cell surface and localize to different regions of the phospholipid bilayer. By analyzing the fluorescence polarization values of TMA-DPH in the plasma membrane and membrane substructures, the fluidity of the cell membrane can be determined^[1][2][3].
Solvent and concentration: DMSO: 10 mM

1. 溶液配制
1.1 工作液配制
用 PBS 或无血清培养基 (pH 7.4) (根据实验优化) 稀释。可根据实际情况稀释相应的储备液。注意，如果溶剂为 DMSO，则必须考虑 DMSO 的细胞毒性，并应制备溶剂对照；如果溶剂为纯水，则工作液在加入细胞前需要过滤并除菌。
注意：工作液应立即配制并使用。避光保存。

2. 细胞染色 (悬浮细胞)
2.1 离心收集细胞，用 PBS 清洗两次，每次 5 分钟。
2.2 将 TMA-DPH 用含 20 mM Hepes 的 Hanks 缓冲液 (pH 7.4) 稀释至 0.5-5 μM，37°C 孵育 5-30 分钟 (根据实验情况优化)。
2.3 400 g 离心 3-4 分钟，弃上清。
2.4 加入 PBS 清洗细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 清洗细胞，并将其重悬于合适的 Hepes 缓冲液 (pH 7.4) 中。
2.6 使用荧光显微镜或流式细胞仪观察。
3.细胞染色 (贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 取下盖玻片，去除培养基，并吸去多余的培养基。
3.3 将 TMA-DPH 用含 20 mM Hepes 的 Hanks 缓冲液 (pH 7.4) 稀释至 0.5-5 μM，37°C 孵育 5-30 分钟 (根据实验情况优化)。
3.4 清洗细胞，并将其重悬于合适的 Hepes 缓冲液 (pH 7.4) 中。
3.5 荧光显微镜检测 (Ex/Em = 355/430 nm)。
注意：如果需要进行流式细胞术检测，染色前需要用胰蛋白酶消化细胞并重悬。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

461.62

C₂₈H₃₁NO₃S

115534-33-3

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

• [1]. Illinger D, et al. The kinetic aspects of intracellular fluorescence labeling with TMA-DPH support the maturation model for endocytosis in L929 cells. J Cell Biol. 1994 May;125(4):783-94.  [Content Brief]

  [2]. Illinger D, et al. A comparison of the fluorescence properties of TMA-DPH as a probe for plasma membrane and for endocytic membrane. Biochim Biophys Acta. 1995 Oct 4;1239(1):58-66.  [Content Brief]

  [3]. Benedetti A, et al. Plasma membrane fluidity in isolated rat hepatocytes: comparative study using DPH and TMA-DPH as fluorescent probes. J Gastroenterol Hepatol. 1989 May-Jun;4(3):221-7.  [Content Brief]