长双歧杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 长双歧杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Bifidobacterium longum Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4021 |
产品组成与特点
核心组分：
预混引物探针（针对长双歧杆菌保守基因序列设计，特异性强）
阳性对照（需单独存放，避免污染）
荧光染料（SYBR Green I）
反应缓冲液、dNTPs、热启动DNA聚合酶等。
技术特点：
高灵敏度：可检测低至1000拷贝/反应的靶标DNA。
一站式设计：无需额外配制引物或对照，减少操作误差。
溶解曲线分析：通过Tm值区分特异性扩增与非特异性产物，确保数据有效性。
实验操作流程
样本准备：
自备待测DNA模板（建议纯度A260/A280为1.8-2.0）。
反应体系配制（以20μL为例）：
模板DNA 2μL
预混PCR Master Mix 10μL
引物探针混合液 2μL
无核酸酶水补至20μL。
PCR程序设置：
预变性：95℃ 5分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
溶解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃升温一次。
结果判定与注意事项
有效性验证：
阳性对照Tm值作为基准，待测样本Tm值需与之匹配，否则视为假阳性。
阴性对照（试剂空白与样本制备空白）应无扩增信号，若出现假阳性需排查污染。
定量分析：
以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算待测样本浓度。
注意事项：
避免反复冻融试剂，分装后使用。
操作时需佩戴手套，防止核酸酶污染。
应用范围
适用于肠道微生物研究、食品检测、临床诊断等领域中长双歧杆菌的快速定量检测。
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