pcr到才修能所料烟神万底要不要加镁离子,纠结?

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PCR反应需要加镁离子,并且镁离子浓度的总量应该比dNTPs的浓度高,常用1.5mmol/L。

镁离子是加在PCR反应的缓冲液中的,成分是最复杂的,除水外一般包括四个有效企味早汽成分:

1、缓冲体系,一般使用HEPES或MOPS缓冲体系;

2、一价阳离子,一般采用钾离究虽看选至明外花每存子,但在特殊情况下也可使用铵根离子;

3、二价阳离来自子,即镁离子,根据反应体系确定,除特殊情况外不需调整;

4、辅助成分,常见的有DMSO、甘油等,主要用来保持酶的活性和帮助DNA解除缠绕结构。

缓冲液的目的是提供合适的酸碱度与某些离子,而PCR反应五要素是:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。

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360问答展资料:

标准的PCR过程:

1、非跑DNA变性

在90℃-96℃下,双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA;


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