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不显色的问题我也遇到过，一般重新配制试剂就可以解决，因为反应中的某个试剂不对或失效就会导致不显色。你说的酸度估计是指反应在偏酸性条件下进行吧。反应中有氢离子参与。 1、 抗坏血酸（hg3-536）：20g/l； 称取10g抗坏血酸，精确至0.5g，称取0.2g乙二胺四乙酸二钠，精确至0.01g，溶于200ml水中，加入8.0ml甲酸，用水稀释至500ml，混匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）。 2、钼酸铵（gb 657）：26g/l溶液； 称取13g钼酸铵，精确至0.5g，称取0.5g酒石酸锑钾，精确至0.01g，溶于200ml水中，加入230ml硫酸溶液（2.2），混匀，冷却后用水稀释至500ml，混匀，贮存于棕色瓶中（有效期二个月）。 3、磷标准溶液：1ml含有0.5g po43－； 称取0.7165g预先在100～105℃干燥并以恒重过的磷酸二氢钾（2.1）精确至0.0002g，溶于约500ml水中，定量转移至1l容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 4、磷标准溶液：1ml含有0.02mg po43－； 取20.00ml磷标准溶液（2.6）于500ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 5、过硫酸钾（gb641），40g/l溶液； 称取20g过硫酸钾，精确至0.5g，溶于500ml水中，摇匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）。 原理：在酸性溶液中，用过硫酸钾作分解剂，将聚磷酸盐和有机磷转化为正磷酸盐，正磷酸盐与钼酸铵反应生成黄色的磷钼杂多酸，再用抗坏血酸还原成磷钼蓝，于710nm最大吸收波长处分光光度法测定。 标准曲线：分别取0（空白）、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00、7.00、8.00磷标准溶液（2.7）于9个50ml容量瓶中，依次向各瓶中加入约25ml水，2.0ml钼酸铵溶液（2.5），3.0ml抗坏血酸溶液（2.4），用水稀释至刻度，摇匀，室温下放置10min。在分光光度计710nm处，用1cm吸收池，以空白调零测吸光度。以测得的吸光度为纵坐标，相对应的po43－量（mg）为横坐标绘制工作曲线。 从试样中取5.00ml试验溶液于100ml锥形瓶中，加入1.0ml硫酸溶液（2.3），5.0ml过硫酸钾溶液（2.8），用水调整锥形瓶中溶液体积至约50ml，置于可调电炉上缓缓煮沸15min至溶液快蒸干为止，取出后流水冷却至室温，定量转移至50ml比色管中。加入2.0ml钼酸铵溶液（2.5），3.0ml抗坏血酸溶液（2.4），用水稀释至刻度，摇匀，室温下放置10min。在分光光度计710nm处，用1cm吸收池，以不加试验溶液的空白调零测吸光度。
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