试述硫色素荧光法测定维生素B1的操作步骤。

参考答案：(1)样品处理：
①提取：样品加入盐酸使其溶解，放入高压锅中来自加热水解后，调节pH至4.5。加入淀粉酶和蛋白酶，于45~50℃温箱过夜保温。取出冷至室温，定容，然后混匀过滤，即为提取液。
②净化：提取液加入装有众诉活性人造浮石的盐基交换柱，用蒸馏水冲洗，重复三次。加入酸性氯化钾定容，洋均帮目应红终养妒哥即为样品净化液。
③怎头巴氧化：将样品净化液分别加入A，B两个反应瓶。在避光条件下将****加入反应瓶A，将碱性铁氰化钾溶液加利神粉敌清物适耐坚盐选入反应瓶B，振摇约15秒，然后加入正丁醇，将A，B两个反应瓶同时振摇。
(2)测定：用荧光分光光度计测定相对荧光强度，根据标准管荧光强植载理胜度计算样品维生素B1含量。