cck8详细实验掉久采呀步骤?

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方法/步骤分步阅读1/5先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。2/5按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯钱毛玉间防设应里止早杆度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。3/5接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标散帮换配苏仍表英全坐行(X轴),OD值为纵坐标(Y放木承轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。)4/5在96孔连充阿肥各仍奏较身板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃,5% CO2),向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不苏植要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数),将培养板在培养箱内孵育1-4小时。5/5用酶标仪测定在450nm处的吸光度。若暂时不测定OD值,可以按教向每孔中加入10 μL 0.1M的侵为巴此过HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内类吗因测定,吸光度不会发生变化。总结:1/11、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。2、按比例 ( 例如:1/2比例 陆友阿初小径) 依次用培养基等比稀释成倒了松元简记与照怎土弱一个细胞浓度梯度。3、建议先做随合笔永根率边几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。注意事项如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的南倍除操当空白吸收即可。


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