生物必修1人鼠细胞融合实验怎么做的?
教材上三言两语,糊涂,不知所为
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人、鼠细胞融合实验分三步进行∶ 首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,人的抗体与发红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合; 第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合; 最后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中,让这些标记抗体同融合细胞膜上相应的抗原结合。 开始,融合的细胞一半是红色,一半是绿色。在37℃下40分钟后,两种颜色的荧光在融合的杂种细胞表面呈均匀分布,这说明抗原蛋白在膜平面内经扩散运动而重新分布。这种过程不需要ATP。如果将对照实验的融合细胞置于低温(1℃)下培育,则抗原蛋白基本停止运动。这一实验结果令人信服地证明了膜整合蛋白的侧向扩散运动。
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能说的详细点么?不知道你说的是哪一章节的内容? 是不是讲生物膜的流动镶嵌模型里荧光标记后人细胞和小鼠细胞的融合实验啊? 实验是这样的: 将人细胞用红色荧光标记 将小鼠细胞用绿色荧光标记; 然后通过某种方法(如可以用电流刺激或用灭活的仙台病毒处理)使2个细胞融合为1个杂交细胞; 刚融合时 杂交细胞是一半红(来自人的细胞膜)一半绿(来自小鼠的细胞膜)的; 在37℃下培养40分钟后 再观察会发现红色和绿色的荧光混杂在一起无法区分。 该实验说明细胞膜具有流动性。(因为细胞膜的流动性使得2种荧光夹杂在一起再无明显界限) 不知道是否能帮到你?如果是其他的实验 请说清楚 谢谢
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为什么还用细胞融合 答:细胞融合的结果是获得杂交细胞,这一技术很好地克服远缘杂交不亲合(不同种生物一般不能产下可育后代,得到杂种)的缺陷。杂交细胞含有两种亲本细胞的遗传信息,这也就为两种不同生物的优良性状集于一身提供了一个新的途径。人鼠细胞融合是为达到更远缘的杂交所做的种间实验,意义在于科学的可行性论证。目前动物细胞融合最具代表性的成就是单抗的生产与研究(教材中有专门提到,去看看书吧)。
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融合的细胞有三种:1老鼠的骨髓瘤细胞和老鼠的骨髓瘤细胞融合 2人的T细胞和T细胞融合 3骨髓瘤细胞和T细胞融合 实验需要的是第三种。2类融合的细胞因为特异性较强而不能在培养基上分裂生成新细胞从而被淘汰。1类细胞不具有T细胞的免疫功能很容易通过一些细菌杀死。能继续分裂而且具有免疫功能的就只剩下3类了
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