Bradfo来自rd法测蛋白浓度(考马斯亮蓝法好通孔测定蛋白质浓度)严重非线性
请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐标值上升越为缓慢,这是什么原因?做了数次都是同样... 请问各位,我在用Bradford法做BSA曲线的时候,总是得不到一条直线,R平方只有0.93,浓度梯度做出来明显成一条曲线,浓度越高,纵坐标值上升越为缓慢,这是什么原因?做了数次都是同样结果。真郁闷 展开
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回答者:网友
Bradford
assay的线形关系有一定限制,在2
µg/ml
低汽斤终呢买述八取到
120
µg/ml之间才存在线形关系。你首先要确定你的
稀释倍数
是不是符合标准。
另外,就是
蛋白质
贵胡庆山本身的
氨基酸
构成了。
考马斯亮蓝
的
显色
原理
好像是由于考马斯亮蓝
分子
与某两个氨基酸的基团(具体不记得了)发生反应。如果你这是混合
蛋白
的话,蛋白的氨基酸构成
比例
也有很大差异的话,很可能360问答得不到直线。
不过看你的
曲线
女故还有一定趋势,估计你是稀释的
倍段号权很话三停岁抓劳介数
不符合标准。