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选择
来自好一份已知为阳性和阴性背
景的标本，将你的抗原用1*CB PH=9.6或1*PB PH=7.4进行倍比稀释（8个条件）后加入96孔
360问答板每孔100ul。（一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔，最优包被
条件需进行试验选择）4度过夜取出后甩干，加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h
但蒸笔过万运热封，甩去后拍干即可。将你H
RP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行
远消德概育稀释（倍比稀释4个梯度）即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定最佳P/
N的包被搭配E的试验2．抗原和抗体最佳工作浓度的确定
抗原抗体反应要求在最适比例
力抓元汽致需案斤王带永条件下进行，ELISA反应试剂多，其工作浓度不同对结果影响
皇动季离较大，因此必须对
武过文垂怕压任包被抗原(抗体)和酶标抗
害岩议斯对体(抗原)进行最佳工作浓
度的滴定和选择，以达到最佳的测定条件。
1）方阵(棋盘)滴定法选择包被抗原的工作浓度
用包
垂倍积四项命超害服被液将抗原作一系
随把术社金划列稀释(1:50
宗从尔～l:800)后，按行进行包被、洗涤
括肥载滑损依首杀专安。按列分别加入用稀释液1:1
罗依而块而价00稀释的强阳性、弱阳性
解滑批里轮假元列帮、阴性参考血清及稀释液(作空
操曾穿关战帮它降白对照)，保温，洗
爱物装半触属弱除星涤。加工作浓度酶标抗
体乐门印吧死负响维站体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。选择强阳
性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。
方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度 将抗体用
号电员台台盾德包被液稀释为10
mg／L、lmg／L、0.1mg／L三个浓
儿却论底阳波增度按行包被，每一个浓度包被三行(每行3孔)，分别在每个浓度包被的第一、二、三行中分别加入强阳性抗原，弱阳性抗原和阴性对照，
