dsDNase 是一种核酸内切酶,能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键,生成带有 5'- 磷酸和 3'- 羟基末端的寡核苷酸。dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA(double-stranded DNA, dsDNA)而不会消化单链
DNA、引物、探针和 RNA。dsDNase 具有热敏感性,可在 55℃条件下快速失活。dsDNase 主要用于反转录实验前快速去除 RNA 样本中的基因组 DNA 污染,与传统的使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染
的方法相比,无需额外加入 EDTA 失活,可减少对 RNA 的损伤,同时节省实验时间,保证 RNA 水平定量的准确性。
产品组成 | 组分 | 规格 |
| dsDNase(1 rxn/μl) | 50 μl |
| 10× dsDNase Buffer | 200 μl |
活性定义根据 Kunitz 实验方法,在 25℃ pH 5.0 的条件下,以过量的大分子 DNA 为底物,在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
储存缓冲液25 mM Tris-HCl (pH7.5,@25℃ ), 2.0 mM MgCl
2, 10 mM NaCl,0.01 % (v/v) Triton X-100, 50 % (v/v) glycerol。
抑制与失活抑制条件:金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性;
失活条件:55℃温育 5 min。
质量控制蛋白质纯度通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色,该酶纯度 ≥90%。
RNA 酶活性检测将酶液与 RNA 底物 在 37 温育 1 h,通过凝胶电泳检测没有发现RNA 底物降解。
功能检测该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了RT-qPCR 扩增,发现去除率 ≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。