葡萄糖激酶(Glucokinase)是一种促进葡萄糖磷酸化为葡萄糖-6-磷酸的酶。葡萄糖激酶存在于人类和大多数其他脊椎动物的肝脏、胰腺、肠道和大脑的细胞中。在这些器官中，它作为一个葡萄糖传感器，在碳水化合物代谢的调节中起着重要的作用，在葡萄糖水平上升或下降时触发代谢或细胞功能的转变，如在餐后或空腹时发生。葡萄糖激酶对葡萄糖的亲和力比其他六激酶低，它的活性局限于少数细胞类型，使其他三种六激酶成为大多数组织和器官用于糖酵解和糖原合成的更重要的葡萄糖制备者。这种酶的基因突变可导致不寻常形式的糖尿病或低血糖症。