mTOR 抗体 (YA281)

目录号: HY-P80231: Data Sheet SDS COA 抗体使用指南
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mTOR Antibody (YA281) 是一个兔来源、无偶联标记、抗 mTOR 的 IgG 单克隆抗体。

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•SSRN. 2025 Sep 23.

WB: 蛋白质免疫印迹;
IHC-P: 石蜡切片样本的免疫组织化学;
IHC-F: 冰冻切片样本的免疫组织化学;
ICC/IF: 细胞免疫荧光;
IF-Tissue: 组织免疫荧光;
mIHC: 多重荧光免疫组化;
IP: 免疫沉淀;
ChIP: 染色质免疫沉淀;
FC: 流式细胞术;
ELISA: 酶联免疫吸附试验

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描述

mTOR Antibody (YA281) is a Rabbit-derived and non-conjugated IgG monoclonal antibody, targeting to mTOR.

宿主

Rabbit

克隆性

Recombinant, Monoclonal

分子量

Predicted band size: 289 kDa;

Observed band size: 289 kDa

请注意：因蛋白存在修饰或聚体等情况，以实测为准，预测仅为参考。

反应种属

Human, Mouse, Rat

蛋白数据库

P42345

基因 ID

2475 [NCBI]

免疫原

Synthetic peptide corresponding to Human mTOR.AA range:2400-2440.

应用 & 推荐
稀释比例

应用	稀释比
WB WB: 蛋白质免疫印迹	1:500-1:1000
IHC-P IHC-P: 石蜡切片样本的免疫组织化学	1:50-1:200
IP IP: 免疫沉淀	Use at an assay dependent concentration.

敏感性	Endogenous	纯度	Protein A affinity purified.
偶联	Non-conjugated	修饰	Unmodified
同型	IgG

性状

液体

组分

Supplied in 1*TBS (pH7.4), 0.05% BSA and 40% Glycerol. Preservative: 0.05% Sodium Azide.

保存条件 & 期限

Stored at -20°C for 1 year. Avoid repeated freeze / thaw cycles.

运输条件

Shipping with blue ice.

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ALL WB IHC-P

Western blot analysis of extracts from Hela (lane 2(20μg), HepG2 (lane 3(20μg), HEK-293 (lane 4(20μg) using mTOR Antibody (HY-P80231) Mouse mAb. Proteins were transferred to a PVDF membrane and blocked with 5% BSA in TBST for 2 hour at room temperature. The primary antibody (HY-P80231, 1/1000) and Loading control antibody (Beta Actin, HY-P80438, 1/3000) was used in 5% BSA in TBST at 4°C overnight. Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG-HRP Secondary Antibody (HY-P8004/HY-P8001, 1/10,000) was used for 1 hour at room temperature.
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded Rat kidney tissue using mTOR Antibody (YA281). The section was pre-treated using heat mediated antigen retrieval with Tris-EDTA buffer (pH 9.0) for 8 minutes. The tissues were blocked in QuickBlock for 20 minutes at room temperature, washed with ddH2O and PBS, and then probed with the primary antibody (HY-P80231, 1/500) in 4℃ overnight. The detection was performed using an HRP conjugated compact polymer system. DAB was used as the chromogen. Tissues were counterstained with hematoxylin and mounted with DPX.
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded Rat kidney tissue using mTOR Antibody (YA281). The section was pre-treated using heat mediated antigen retrieval with Tris-EDTA buffer (pH 9.0) for 8 minutes. The tissues were blocked in QuickBlock for 20 minutes at room temperature, washed with ddH2O and PBS, and then probed with the primary antibody (HY-P80231, 1/500) in 4℃ overnight. The detection was performed using an HRP conjugated compact polymer system. DAB was used as the chromogen. Tissues were counterstained with hematoxylin and mounted with DPX.

背景

功能：丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶是细胞代谢、生长和存活的中心调节因子，响应激素、生长因子、营养物质、能量和应激信号 (PubMed:12087098, PubMed:12150925, PubMed:12150926, PubMed:12231510, PubMed:12718876, PubMed:14651849, PubMed:15268862, PubMed:15467718, PubMed:15545625, PubMed:15718470, PubMed:18497260, PubMed:18762023, PubMed:18925875, PubMed:20516213)。 PubMed:20537536, PubMed:21659604, PubMed:23429703, PubMed:23429704, PubMed:25799227, PubMed:26018084, PubMed:29150432, PubMed:29236692, PubMed:31112131, PubMed:31601708, PubMed:32561715, PubMed:34519269, PubMed:37751742)。 MTOR 直接或间接调节至少 800 种蛋白质的磷酸化 (PubMed:15268862, PubMed:15467718, PubMed:17517883, PubMed:18372248, PubMed:18497260, PubMed:18925875, PubMed:20516213, PubMed:21576368, PubMed:21659604, PubMed:23429704, PubMed:30171069, PubMed:29236692, PubMed:37751742)。作为两个结构和功能不同的信号复合物 mTORC1 和 mTORC2 (mTOR 复合物 1 和 2) 的一部分发挥作用 (PubMed:15268862, PubMed:15467718, PubMed:18497260, PubMed:18925875, PubMed:20516213, PubMed:21576368, PubMed:21659604, PubMed:23429704, PubMed:29424687, PubMed:29567957, PubMed:35926713)。响应营养物质、生长因子或氨基酸，mTORC1 被募集到溶酶体膜，并通过磷酸化 mRNA 翻译和核糖体合成的关键调节因子来促进蛋白质、脂质和核苷酸的合成 (PubMed:12087098, PubMed:12150925, PubMed:12150926, PubMed:12231510, PubMed:12718876, PubMed:14651849, PubMed:15268862, PubMed:15467718, PubMed:15545625, PubMed:15718470, PubMed:18497260, PubMed:18762023, PubMed:18925875)。 PubMed:20516213, PubMed:20537536, PubMed:21659604, PubMed:23429703, PubMed:23429704, PubMed:25799227, PubMed:26018084, PubMed:29150432, PubMed:29236692, PubMed:31112131, PubMed:34519269)。这包括 EIF4EBP1 的磷酸化及其对延伸起始因子 4E (eiF4E) 抑制作用的解除 (PubMed:24403073, PubMed:29236692)。此外，它还能磷酸化并激活 RPS6KB1 和 RPS6KB2，通过调节其下游靶标 (包括核糖体蛋白 S6、真核翻译起始因子 EIF4B 和翻译起始抑制剂 PDCD4) 的活性来促进蛋白质合成 (PubMed:12087098, PubMed:12150925, PubMed:18925875, PubMed:29150432, PubMed:29236692)。它通过两种途径刺激嘧啶生物合成途径：一是通过 RPS6KB1 介导的生物合成酶 CAD 的磷酸化进行急性调节；二是通过增强磷酸戊糖途径的转录进行延迟调节，该途径产生 5-磷酸核糖基-1-焦磷酸 (PRPP)，PRPP 是 CAD 在合成后期步骤中的变构激活剂。此功能依赖于 mTORC1 复合物 (PubMed:23429703, PubMed:23429704)。它通过磷酸化和抑制 RNA 聚合酶 III 阻遏物 MAF1 来激活 RNA 聚合酶 III 依赖性转录，从而调节核糖体合成 (PubMed:20516213)。它通过介导 SERBP1 的磷酸化来激活休眠的核糖体，导致 SERBP1 失活并重新激活翻译 (PubMed:36691768)。除了蛋白质合成外，mTORC1 还通过 SREBF1/SREBP1 和 LPIN1 调控脂质合成 (PubMed:23426360)。为了维持能量稳态，mTORC1 也可能通过调控 PPARGC1A 来调控线粒体生物合成 (基于相似性)。同时，mTORC1 抑制分解代谢途径：通过磷酸化 ULK1 负调控自噬 (PubMed:32561715)。在营养充足的情况下，mTORC1 在 Ser-758 位点磷酸化 ULK1，破坏其与 AMPK 的相互作用，从而阻止 ULK1 的激活 (PubMed:32561715)。此外，mTORC1 还通过磷酸化自噬抑制因子 DAP 来抑制自噬 (PubMed:20537536)。在营养丰富的条件下，mTORC1 可通过磷酸化 RUBCNL/Pacer 来抑制自噬 (PubMed:30704899)。它还可通过介导 AMBRA1 的磷酸化来抑制自噬，从而抑制 AMBRA1 介导 ULK1 泛素化以及 AMBRA1 与 PPP2CA 相互作用的能力 (PubMed:23524951, PubMed:25438055)。mTORC1 对上游生长因子信号通路发挥反馈调控作用，包括磷酸化和激活 GRB10 (一种 INSR 依赖性信号抑制因子)(PubMed:21659604)。除其他潜在靶点外，mTORC1 还可能磷酸化 CLIP1 并调节微管 (PubMed:12231510)。 mTORC1 复合物在饥饿和氨基酸耗竭时受到抑制 (PubMed:12150925, PubMed:12150926, PubMed:24403073, PubMed:31695197)。非经典 mTORC1 复合物不依赖于 RHEB 发挥作用，在营养物质存在的情况下，特异性地介导 MiT/TFE 因子 MITF、TFEB 和 TFE3 的磷酸化，促进它们在胞质中的滞留和失活 (PubMed:22343943, PubMed:22576015, PubMed:22692423, PubMed:24448649, PubMed:32612235, PubMed:36608670, PubMed:36697823)。在饥饿或溶酶体应激条件下，mTORC1 的抑制会诱导 TFEB 和 TFE3 的去磷酸化和核转位，从而促进它们的转录因子活性 (PubMed:22343943, PubMed:22576015, PubMed:22692423, PubMed:24448649, PubMed:32612235, PubMed:36608670)。mTORC1 复合物通过促进 GSDMD 寡聚化来调节巨噬细胞的焦亡 (PubMed:34289345)。MTOR 磷酸化 RPTOR，而 RPTOR 反过来抑制 mTORC1 (基于相似性)。作为 mTORC2 复合物的一部分，MTOR 将生长因子的信号传递到参与增殖、细胞骨架组织、脂肪生成和合成代谢输出的通路 (PubMed:15268862, PubMed:15467718, PubMed:24670654, PubMed:29424687, PubMed:29567957, PubMed:35926713)。响应生长因子，mTORC2 磷酸化并激活 AGC 蛋白激酶家族成员，包括 AKT (AKT1、AKT2 和 AKT3)、PKC (PRKCA、PRKCB 和 PRKCE) 和 SGK1 (PubMed:15268862, PubMed:15467718, PubMed:21376236, PubMed:24670654, PubMed:29424687, PubMed:29567957, PubMed:35926713)。与 mTORC1 不同，mTORC2 对营养不敏感 (PubMed:15467718)。 mTORC2 在 AKT1 激活中发挥关键作用，它根据不同的环境介导不同位点的磷酸化，例如 Thr-450、Ser-473、Ser-477 或 Thr-479，从而促进 PDPK1/PDK1 对 AKT1 激活环 Thr-308 位点的磷酸化，这是 AKT1 完全激活的先决条件 (PubMed:15718470, PubMed:21376236, PubMed:24670654, PubMed:29424687, PubMed:29567957)。mTORC2 还调节 SGK1 Ser-422 位点的磷酸化 (PubMed:18925875)。 mTORC2 可能通过磷酸化 PRKCA 和 PXN，以及激活 Rho 型鸟嘌呤核苷酸交换因子 RHOA 和 RAC1A 或 RAC1B 来调节肌动蛋白细胞骨架 (PubMed:15268862)。mTORC2 复合物还能磷酸化多种参与胰岛素信号传导的蛋白质，例如 FBXW8 和 IGF2BP1 (基于相似性)。mTORC2 也可能通过作为酪氨酸蛋白激酶催化 IGF1R 和 INSR 的磷酸化来调节胰岛素信号传导；然而，还需要更多体内证据来证实这一结果 (PubMed:26584640)。mTORC2 通过调节 CEBPB 亚型的表达来调节破骨细胞生成 (基于相似性)。mTORC2 在生物钟功能中发挥重要的调节作用；调节视交叉上核 (SCN) 和肝脏生物钟的周期长度和节律振幅 (基于相似性)。

亚细胞定位：溶酶体膜；外周膜蛋白；胞质侧；内质网膜；外周膜蛋白；胞质侧；高尔基体膜；外周膜蛋白；胞质侧；细胞膜；外周膜蛋白；线粒体外膜；外周膜蛋白；胞质侧；胞质；细胞核；细胞核，PML 体；微粒体膜；胞质囊泡，吞噬体

表达水平：
组织特异性：在多种组织中表达，在睾丸中含量最高

亚基：雷帕霉素靶蛋白复合物 1 (mTORC1) 的一部分，该复合物包含 MTOR、MLST8 和 RPTOR。

RRID

AB_3102364

反应种属数据库

Entrez Gene: 2475 Human ; 56717 Mouse ; 56718 Rat

SwissProt: P42345 Human ; Q9JLN9 Mouse ; P42346 Rat

OMIM: 616638 Human

研究领域

Cell Biology

中文名

mTOR 抗体 (YA281)

文件资料

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Data Sheet (443 KB) SDS (251 KB)

COA (193 KB)

抗体使用指南 (1083 KB)

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Do most proteins show cross-species activity?
Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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