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SQSTM1/p62 抗体 (YA062)

目录号: HY-P80899
COA 抗体使用指南 技术支持

SQSTM1/p62 Antibody (YA062) 是一个兔来源、无偶联标记、抗 SQSTM1/p62 的 IgG 单克隆抗体。

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  • WB: 蛋白质免疫印迹;
  • IHC-P: 石蜡切片样本的免疫组织化学;
  • IHC-F: 冰冻切片样本的免疫组织化学;
  • ICC/IF: 细胞免疫荧光;
  • IF-Tissue: 组织免疫荧光;
  • mIHC: 多重荧光免疫组化;
  • IP: 免疫沉淀;
  • ChIP: 染色质免疫沉淀;
  • FC: 流式细胞术;
  • ELISA: 酶联免疫吸附试验

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描述

SQSTM1/p62 Antibody (YA062) is a Rabbit-derived and non-conjugated IgG monoclonal antibody, targeting to SQSTM1/p62.
宿主

Rabbit
克隆性

Recombinant, Monoclonal
分子量
Predicted band size: 48 kDa;
Observed band size: 62 kDa
请注意：因蛋白存在修饰或聚体等情况，以实测为准，预测仅为参考。
反应种属
Human, Mouse
蛋白数据库
基因 ID
免疫原

Synthetic peptide corresponding to Human SQSTM1.The exact sequence is proprietary to MCE.
应用 & 推荐
稀释比例
应用 稀释比
WB
WB: 蛋白质免疫印迹
1:500-1:1000
IHC-P
IHC-P: 石蜡切片样本的免疫组织化学
1:50-1:100
IHC-F
IHC-F: 冰冻切片样本的免疫组织化学
1:50-1:100
ICC/IF
ICC/IF: 细胞免疫荧光
1:50-1:200
IP
IP: 免疫沉淀
1:20
敏感性 Endogenous 纯度 affinity purified
偶联 Non-conjugated 修饰 Unmodified
同型 IgG  
性状

液体
组分

Supplied in 50 mM Tris-Glycine (pH 7.4), 0.15 M NaCl, 40% Glycerol and 0.05% BSA. Preservative: 0.01% Sodium azide
保存条件 & 期限

Stored at -20°C for 1 year. Avoid repeated freeze / thaw cycles.
运输条件

Shipping with blue ice.
验证图片
ALL WB ICC IHC-P

  • Western blot analysis of extracts from K562 (lane 2(20μg), NIH3T3 (lane 3(20μg) and Hela (lane 4(20μg) using SQSTM1/p62 (HY-P80899) Rabbit mAb. Proteins were transferred to a PVDF membrane and blocked with 5% non-fat milk in TBST for 2 hour at room temperature. The primary antibody (1/1000) and Loading control antibody (Beta Actin, HY-P80438, 1/10000) was used in 5% non-fat milk in TBST at 4°C overnight. Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG-HRP Secondary Antibody (1/10000) was used for 1 hour at room temperature.

  • Immunocytochemistry analysis of A549 cells labeling SQSTM1/p62 with SQSTM1/p62 Antibody (HY-P80899) at 1/50 dilution. Cells were fixed in 4% paraformaldehyde for 15 minutes at room temperature, permeabilized with 0.1% Triton X-100 for 10 minutes at room temperature, then blocked with QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining for 10 min at room temperature. Cells were then incubated with SQSTM1/p62 antibody (HY-P80899) at 1/50 dilution in QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining at 4 ℃. Alexa Fluor® 488-conjugated AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG H&L（HY-P8002, Green) was used as the secondary antibody at 1/1,000 dilution. PBS instead of the primary antibody was used as the secondary antibody only control. The Nuclear counterstain was DAPI (Blue).

  • Immunocytochemistry analysis of HepG2 cells labeling SQSTM1/p62 with SQSTM1/p62 Antibody (HY-P80899) at 1/50 dilution. Cells were fixed in 4% paraformaldehyde for 15 minutes at room temperature, permeabilized with 0.1% Triton X-100 for 10 minutes at room temperature, then blocked with QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining for 10 min at room temperature. Cells were then incubated with SQSTM1/p62 antibody (HY-P80899) at 1/200 dilution in QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining at 4 ℃. Alexa Fluor® 488-conjugated AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG H&L（HY-P8002, Green) was used as the secondary antibody at 1/1,000 dilution. PBS instead of the primary antibody was used as the secondary antibody only control. The Nuclear counterstain was DAPI (Blue).

  • Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse liver tissue using SQSTM1p62 Antibody. The section was pre-treated using heat mediated antigen retrieval with sodium citrate buffer (pH 6.0) for 8 minutes. The tissues were blocked in QuickBlock for 20 minutes at room temperature, washed with ddH2O and PBS, and then probed with the primary antibody at 1/100 dilution in 4℃ overnight. The detection was performed using an HRP conjugated compact polymer system. DAB was used as the chromogen. Tissues were counterstained with hematoxylin and mounted with DPX.

  • Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse liver tissue using SQSTM1p62 Antibody. The section was pre-treated using heat mediated antigen retrieval with sodium citrate buffer (pH 6.0) for 8 minutes. The tissues were blocked in QuickBlock for 20 minutes at room temperature, washed with ddH2O and PBS, and then probed with the primary antibody at 1/100 dilution in 4℃ overnight. The detection was performed using an HRP conjugated compact polymer system. DAB was used as the chromogen. Tissues were counterstained with hematoxylin and mounted with DPX.

背景
功能：分子适配器是选择性巨自噬 (聚集体自噬) 所必需的，它作为多聚泛素化蛋白和自噬体之间的桥梁 (PubMed:15340068, PubMed:15953362, PubMed:16286508, PubMed:17580304, PubMed:20168092, PubMed:22017874, PubMed:22622177, PubMed:24128730, PubMed:28404643, PubMed:29343546, PubMed:29507397, PubMed:31857589, PubMed:33509017, PubMed:34471133, PubMed:34893540, PubMed:35831301, PubMed:37306101, PubMed:37802024)。通过多个结构域在不同步骤中连接蛋白质和细胞器，促进泛素化货物蛋白募集到自噬体 (PubMed:16286508, PubMed:20168092, PubMed:22622177, PubMed:24128730, PubMed:28404643, PubMed:29343546, PubMed:29507397, PubMed:34893540, PubMed:37802024)。 SQSTM1 首先通过其 UBA 结构域与泛素化蛋白结合，发生液-液相分离，从而介导泛素化蛋白的组装和去除，导致形成不溶性细胞质内含物，即 p62 体 (PubMed:15911346, PubMed:20168092, PubMed:22017874, PubMed:24128730, PubMed:29343546, PubMed:29507397, PubMed:31857589, PubMed:37802024)。 SQSTM1 通过其 LIR 基序与自噬体上的 ATG8 家族蛋白相互作用，导致 p62 小体募集至自噬体，随后泛素化蛋白被自噬清除 (PubMed:16286508, PubMed:17580304, PubMed:20168092, PubMed:22622177, PubMed:24128730, PubMed:28404643, PubMed:37802024)。SQSTM1 自身与其泛素化货物一起被降解 (PubMed:16286508, PubMed:17580304, PubMed:37802024)。此外，它还负责将泛素化蛋白募集到细胞核内的 PML 小体 (PubMed:20168092)。它还参与过氧化物酶体自噬 (过氧化物酶体自噬)，以响应活性氧 (ROS)，在泛素化的 PEX5 受体和自噬体之间起桥梁作用 (PubMed:26344566)。它通过与 KEAP1 相互作用激活 NFE2L2/NRF2 通路：这种相互作用通过将 BCR (KEAP1) 复合物隔离在包涵体中而使其失活，从而促进 NFE2L2/NRF2 在细胞核内的积累，并随后表达细胞保护基因 (PubMed:20452972, PubMed:28380357, PubMed:33393215, PubMed:37306101)。促进赖氨酸 63 连接的泛素化 STING1 向自噬体的重新定位 (PubMed:29496741)。参与内体组织，通过将囊泡保留在核周云中来实现：在 RNF26 泛素化后，吸引特定的囊泡相关衔接蛋白，形成分子桥，将同源囊泡限制在核周区域，并组织内体途径以实现高效的货物运输 (PubMed:27368102, PubMed:33472082)。将张力蛋白 TNS2 隔离到细胞质斑点中，促进 TNS2 的泛素化和蛋白酶体降解 (PubMed:25101860)。可能通过 TNF-α、神经生长因子 (NGF) 和白细胞介素-1 调节 NFKB1 的激活 (PubMed:10356400, PubMed:10747026, PubMed:11244088, PubMed:12471037, PubMed:16079148, PubMed:19931284)。可能在肌肉细胞中参与肌联蛋白/TTN 下游信号传导 (PubMed:15802564)。介导 TRAF6 和 CYLD 相互作用的衔接蛋白 (基于相似性)。
亚细胞定位：细胞质囊泡，自噬体；自噬体前体结构；细胞质，胞质溶胶；细胞核，PML 体；晚期内体；溶酶体；细胞核；内质网；细胞质，肌原纤维，肌节
表达水平：
组织特异性：普遍表达

诱导：蛋白酶体抑制剂 PSI 和前列腺素 J2 (PGJ2) (在蛋白质水平) 可抑制其表达。佛波醇 12-肉豆蔻酸酯 13-乙酸酯 (PMA) 也可抑制其表达。NFE2L2/NRF2 可直接激活其表达，形成正反馈回路 (PubMed:20452972) 。
异构体 & 翻译后修饰：Q13501 有两种异构体：Q13501-1：47687 Da (预测值)；Q13501-2：38629 Da (预测值)。
ULK1 对 Ser-407 位点的磷酸化会破坏 UBA 二聚体界面，并增加其与泛素化蛋白的结合亲和力 (基于序列相似性)。Ser-407 位点的磷酸化也为后续 Ser-403 位点的磷酸化做好准备 (基于序列相似性)。CK2 或 ULK1 对 Ser-403 位点的磷酸化通过增加 UBA 结构域与多聚泛素链之间的亲和力来促进其与泛素化蛋白的结合 (PubMed:22017874, PubMed:25040165)。SESN2 可刺激 ULK1 对 Ser-403 位点的磷酸化 (PubMed:25040165)。 TBK1 对 Ser-403 位点进行磷酸化，促进 Lys-63 连接的泛素化 STING1 向自噬体转移 (PubMed:29496741)。ULK1 对 Ser-349 位点进行磷酸化，促进 STING1 与 KEAP1 相互作用并使 BCR (KEAP1) 复合物失活，从而促进 NFE2L2/NRF2 核内积累和 II 期解毒酶的表达 (PubMed:37306101)。 SQSTM1 在体外可被 TTN 磷酸化 (PubMed:15802564)；在 Lys-435 位点被 UBE2J1 和 RNF26 泛素化：泛素化的 SQSTM1 可吸引特定的囊泡相关衔接蛋白，形成分子桥，将同源囊泡限制在核周区域，并组织内体途径以实现高效的货物运输 (PubMed:27368102, PubMed:33472082)。UBE2D2 和 UBE2D3 的泛素化作用通过破坏 UBA 二聚体界面增强其与多聚泛素链的结合能力 (PubMed:28322253)。USP15 的去泛素化作用释放靶囊泡，使其快速运输至细胞外周 (PubMed:27368102)。 BCR (KEAP1) 复合物在 Lys-420 位点对其进行泛素化修饰，增强 SQSTM1 的螯合活性并促进其降解 (PubMed:28380357)。通过 Lys-29 和 Lys-33 连接的多聚泛素化修饰，导致细菌被异噬体靶向并抑制其复制 (PubMed:27880896)；KAT5/TIP60 在 Lys-420 和 Lys-435 位点对其进行乙酰化修饰，通过破坏 UBA 二聚体界面并增加与泛素化蛋白的结合亲和力来促进其活性 (PubMed:31857589)。经 HDAC6 去乙酰化 (PubMed:31857589)；ZDHHC19 对 Cys-289 和 Cys-290 的棕榈酰化修饰是 SQSTM1-货物复合物有效自噬降解所必需的，其机制是通过促进与 ATG8 蛋白的亲和力以及将 p62 小体募集到自噬体 (PubMed:37802024)。经 LYPLA1 对 Cys-289 和 Cys-290 的去棕榈酰化修饰 (PubMed:37802024)；(微生物感染) 被化脓性链球菌 SpeB 蛋白酶切割，导致其降解 (PubMed:24331465)。SpeB 的降解作用可阻止自噬，促进化脓性链球菌的细胞内复制 (PubMed:24331465)；(微生物感染) 经 Epstein-Barr 病毒 BPLF1 去泛素化修饰；导致 MAP1LC3A/LC3 募集至 SQSTM1 阳性结构受到抑制
亚基：同源寡聚体或异源寡聚体；可形成同型阵列 (PubMed:12887891, PubMed:19931284)。二聚化会干扰泛素结合 (PubMed:19931284)。是与 PAWR 和 PRKCZ 形成三元复合物的组成部分 (PubMed:11755531)。与 JUB/Ajuba、PRKCZ 和 TRAF6 形成复合物 (PubMed:15870274)。在与 TRAF6 和 CYLD 形成的复合物中被鉴定 (基于相似性)。在与泛素和 ZFAND5 形成的异源三聚体复合物中被鉴定，其中 ZFAND5 和 SQSTM1 均与同一泛素分子相互作用 (PubMed:21923101)。通过 LIR 基序与 MAP1LC3A 和 MAP1LC3B 以及其他 ATG8 家族成员 (包括 GABARAP、GABARAPL1 和 GABARAPL2) 相互作用；这些相互作用对于将 MAP1LC3 家族成员募集到含有多聚泛素化蛋白聚集体的包涵体以及通过自噬降解这些聚集体是必需的 (PubMed:16286508, PubMed:17580304, PubMed:22421968, PubMed:24089205, PubMed:24668264)。直接与 PRKCI 和 PRKCZ 相互作用 (PubMed:10356400, PubMed:12813044, PubMed:12887891, PubMed:9566925)。与 EBI3、LCK、RASA1、NR2F2、NTRK1、NTRK2、NTRK3、NBR1、MAP2K5 和 MAPKAPK5 相互作用 (PubMed:10708586、PubMed:11244088、PubMed:12471037、PubMed:8551575、PubMed:8618896、PubMed:8650207、PubMed:8910285)。在 TNF-α 刺激下，与 RIPK1 相互作用，可能将 IKBKB 连接到由 TNF-R1/TNFRSF1A、TRADD 和 RIPK1 组成的 TNF-R1 复合物 (PubMed:10747026)。与蛋白酶体亚基 PSMD4 和 PSMC2 相互作用 (PubMed:15340068)。与 TRAF6 相互作用 (PubMed:10747026)。与 Lys-63 连接的多聚泛素化 MAPT/TAU 相互作用 (PubMed:15953362)。与 FHOD3 相互作用 (PubMed:21149568)。与 CYLD 相互作用 (PubMed:32185393)。与 SESN1 相互作用 (PubMed:23274085)。与 SESN2 相互作用 (PubMed:23274085, PubMed:25040165)。与 ULK1 相互作用 (PubMed:25040165)。与 UBD 相互作用 (PubMed:25422469)。与 WDR81 相互作用；该相互作用是直接的，并调节 SQSTM1 与泛素化蛋白的相互作用 (PubMed:28404643)。与 WDFY3 相互作用；这种相互作用是 WDFY3 募集到胞质体和 PML 体所必需的 (PubMed:20168092)。与 LRRC25 相互作用 (PubMed:29288164)。与 STING1 相互作用；导致 STING1 重新定位到自噬体 (PubMed:29496741)。(当 Ser-349 位点磷酸化时) 与 KEAP1 相互作用；这种相互作用是直接的，通过将 KEAP1 隔离在包涵体中，促进其降解，从而使 BCR (KEAP1) 复合物失活 (PubMed:20452972, PubMed:20495340, PubMed:37306101)。与 MOAP1 相互作用；促进 SQSTM1 包涵体解离，从而隔离 KEAP1 (PubMed:33393215)。与 GBP1 相互作用 (基于相似性)。与 TAX1BP1 相互作用 (PubMed:34471133)。与 (泛素化的) PEX5 相互作用；特异性结合在活性氧 (ROS) 刺激下于“Lys-209”位点泛素化的 PEX5 (PubMed:26344566)。(通过 PB1 结构域) 与 TNS2 相互作用；该相互作用导致 TNS2 与 SQSTM1 聚集在细胞质中，并促进 TNS2 的泛素化和蛋白酶体降解 (PubMed:25101860)。与 IRS1 相互作用；张力蛋白 TNS2 的存在会破坏这种相互作用 (PubMed:25101860)。与 TRIM5 相互作用 (PubMed:20357094, PubMed:25127057)。与 TRIM11 (泛素化后) 相互作用；促进 AIM2 募集至自噬体并进行自噬依赖性 AIM2 降解 (PubMed:27498865)。与 TRIM13 相互作用 (PubMed:22178386)。与 TRIM16 相互作用 (PubMed:30143514)。与 TRIM23 相互作用 (PubMed:28871090)。与 TRIM50 相互作用 (PubMed:22792322)。与 TRIM55 相互作用 (PubMed:15802564)。与 ECSIT 相互作用；该相互作用通过功能性调控 TRAF6-ECSIT 复合物抑制 TLR4 信号通路 (PubMed:31281713)。与 GABRR1、GABRR2 和 GABRR3 相互作用 (基于相似性)。与 WDR83 相互作用 (PubMed:38103557)。与 GRB2 相互作用 (PubMed:35831301)。与 USP12 相互作用；该相互作用独立于 USP12 的去泛素化酶活性，可能参与自噬通量的调控 (PubMed:30266909)。与 ASB6 相互作用 (PubMed:34164402)。
RRID
反应种属数据库

Entrez Gene: 8878 Human ; 18412 Mouse ; 113894 Rat

SwissProt: Q13501 Human ; Q64337 Mouse ; O08623 Rat

OMIM: 167250 Human

研究领域

Signal Transduction
中文名
SQSTM1/p62 抗体 (YA062)
同用名
p60; p62; A170; DMRV; OSIL; PDB3; ZIP3; p62B; NADGP; FTDALS3
文件资料

COA (194 KB)

抗体使用指南 (1083 KB)

SQSTM1/p62 Antibody (YA062) 相关分类

Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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