液体沙氏培养基(Sabouraud Dextrose Broth,简称SDB)是一种专为真菌(包括酵母菌和霉菌)增菌培养设计的液体培养基,以其低pH和高糖分的特性,能有效抑制大多数细菌的生长。该培养基由真菌学家Raymond Sabouraud于1892年配方,最初用于皮肤癣菌的培养,现已成为全球药典(如USP、EP、JP、CP)和标准方法(如GB)中推荐的通用真菌培养基。无论是药品质量控制、临床诊断还是公共卫生监测，它都为真菌的准确培养提供了可靠的保障。
液体沙氏培养基的成分
液体沙氏培养基的配方非常简洁,由5.0 - 10.0(g/L)的蛋白胨,20.0 - 40.0(g/L)的葡萄糖和0.01(g/L)的氯霉素组成。蛋白胨提供氮源、氨基酸、维生素等,支持真菌生长,葡萄糖提供充足的碳源和能量。高浓度糖分有助于维持低pH环境,氯霉素属于选择性添加剂,强力抑制细菌生长,但不影响真菌,用于处理污染严重的样本。该培养基的核心选择性来自其低pH值(通常为5.6 ± 0.2)。这个酸性环境非常适合真菌生长,同时能强烈抑制大多数杂菌。
应用领域
根据《中国药典》、USP、EP等药典规定,用于药品、生物制品中霉菌和酵母菌的无菌检测(即检查产品是否被真菌污染)。液体沙氏培养基用于处理皮肤癣、甲癣等临床样本,从混合菌群中选择性增菌和分离致病性真菌,如念珠菌、曲霉菌、皮肤癣菌等。依据GB标准,用于一次性使用卫生用品(如纸巾、口罩等)中真菌的定性检测。也适用于食品、化妆品、生物负载测试等领域。作为基础液体培养基,用于实验室中真菌菌株的短期保存和常规传代培养。
工作原理
真菌通常耐酸,而大多数细菌在中性(pH 7.2-7.4)环境下生长最佳。液体沙氏培养基约5.6的pH值,使其成为真菌的适宜生长环境,而细菌则不能顺利生长。高浓度的葡萄糖为快速生长的真菌提供了充足能量,蛋白胨则提供必需的氮源和生长因子,保证真菌能够旺盛生长。
使用方法和注意事项
首先取液体沙氏培养基干粉(如标准SDB配方为30g/L,含抗生素的为50.1g/L)于1L纯水中,加热煮沸至完全溶解,然后121°C高压灭菌15分钟。若配方中含有氯霉素,需严格按照说明书推荐的灭菌条件(如115°C)进行操作,以防抗生素失效。
培养条件通常控制在20-25°C或25-30°C下,需氧培养48-72小时。对于生长缓慢的真菌,可能需要延长至数周。在液体沙氏培养基中白色念珠菌(Candida albicans)应生长良好,培养基变浑浊，黑曲霉(Aspergillus brasiliensis)应形成絮状菌丝，大肠埃希氏菌(E. coli)应被抑制,培养基保持澄清。
液体沙氏培养基的选择
实验目的：了解液体沙氏培养基对真菌检测结果的影响，为一次性使用卫生用品实验室检测提供依据。选7种不同厂家生产的沙氏培养基(含氯霉素与否)用0.9%生理盐水倍比稀释后进行真菌菌落总数检测。结果:白色念珠菌(CMCC10231)、黑曲霉菌(ATCC16404)和酵母菌(ATCC18790)在7种培养基各稀释度平皿上菌落生长速度、菌落形态及大小、菌落总数基本一致;金黄色葡萄球(ATCC260039)和大肠杆菌(ATCC25922)在含氯霉素沙氏培养基上生长均受抑制。结论:一次性使用卫生用品真菌菌落总数检测应选用含氯霉素的沙氏琼脂培养基,抑制细菌生长,提高实验室的准确度。
参考文献
[1] 吴幼玲. 几种沙氏培养基真菌生长情况比较[J]. 海峡预防医学杂志, 2014, 20(4): 46-47.