肝癌是全球发病率居第6位、致死率居第2位的恶性肿瘤，我国肝癌发病和死亡人数占全球一半以上[1]。深入研究肝癌侵袭、转移的分子机制，寻找新的生物标志物和治疗靶点，是改善肝癌预后的关键。β细胞素（BTC）作为表皮生长因子（EGF）家族的成员之一，在肝癌、胰腺癌、子宫内膜癌等多种肿瘤组织中呈现高表达，且其表达水平与肿瘤的病理特征及侵袭能力密切相关[1]。因此，准确检测BTC蛋白的表达水平成为相关研究的重要环节。人Β细胞素(BTC) ELISA KIT是一种用于体外定量检测人类样本中β细胞素（Betacellulin, BTC）蛋白浓度的科研工具，凭借其操作简便、灵敏度高、通量大的优势，成为实验室定量检测BTC蛋白的非常重要的工具之一。
人Β细胞素(BTC) ELISA KIT信息介绍
人Β细胞素(BTC) ELISA KIT通过双抗体夹心法，实现对血清、血浆、细胞培养上清等生物样本中BTC蛋白的高特异性和高灵敏度定量检测。实验原理：该试剂盒的核心是双抗体夹心酶联免疫吸附测定技术。简单来说，就是将特异性捕获抗体预先包被在酶标板上，加入样本后，样本中的BTC蛋白与捕获抗体结合，再加入带有标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-抗体”的复合物，最后通过显色反应，颜色的深浅与样本中BTC的浓度成正比，通过酶标仪读取吸光度（通常为450 nm），对照标准曲线计算BTC浓度。
样本处理与注意事项
血清、血浆样本收集后应尽快检测，或分装后于-20℃或-70℃冷冻保存，避免反复冻融。实验操作时，应详细阅读说明书，注意使用不含叠氮钠的缓冲液（叠氮钠会抑制HRP酶活性）。特别注意，所有ELISA试剂盒仅限科研使用（Research Use Only, RUO），严禁用于临床诊断。
肝癌细胞系中BTC表达水平的检测
检测正常肝脏细胞系HL-7702和四种肝癌细胞系（Huh7、HepG2、SMMC7721、MHCC97-H）中BTC的表达水平，发现四种肝癌细胞系中BTC的mRNA和蛋白表达量均高于正常肝脏细胞系，且在侵袭能力更高的SMMC7721和MHCC97-H细胞中BTC表达更高。下调BTC后两种肝癌细胞的侵袭能力明显降低。同时下调BTC可抑制AKT的磷酸化，并降低XIAP（X连锁凋亡抑制蛋白）的表达，提示BTC可能通过PI3K/AKT-XIAP信号通路调控肝癌细胞的侵袭能力[1]。在此类研究中，人Β细胞素(BTC) ELISA KIT可用于检测外源给予BTC重组蛋白后细胞培养上清中BTC的实际浓度，或检测不同实验条件下BTC的分泌动态变化，从而更全面地理解BTC的生物学功能。
参考文献
[1] 李军, 白娟, 窦科峰, 安家泽. β细胞素下调对肝癌细胞增殖能力的影响及其机制探讨[J]. 陕西医学杂志, 2016, 45(6): 643-645, 655.