DMEM高糖培养基是一种应用广泛的哺乳动物细胞基础培养基,核心特点是含有高浓度D-葡萄糖(4.5 g/L),同时富含氨基酸(L-谷氨酰胺等)、维生素(叶酸、B12等)、无机盐(硝酸铁等)和丙酮酸钠。这些成分能够支持多种哺乳动物细胞的生长,同时高糖本身作为一种应激源,可诱导细胞发生与糖尿病类似的病理改变。

核心成分与特点
典型DMEM高糖培养基的基础配方如下:葡萄糖4.5 g/L (4500 mg/L)、13种氨基酸、8种维生素、无机盐如硝酸铁等、碳酸氢钠(NaHCO₃)、丙酮酸钠 0.11 g/L (1 mM)、pH指示剂酚红 (15 mg/L)、缓冲剂HEPES(可选择添加)。因品牌和定制需求,会对部分成分(如L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等)进行调整,在使用前需仔细核对说明书。
应用领域
DMEM高糖培养基应用于多种快速生长的细胞系(如 HeLa、HEK293、CHO、Cos-7 等)和部分原代细胞(如成纤维细胞、神经胶质细胞等)。在生物制药的应用中,可大规模生产重组蛋白和疫苗,同时它适用于DNA转染后的转化细胞培养等基因操作,也常用于杂交瘤细胞融合、单克隆抗体生产以及多种病毒宿主细胞的培养。
注意事项
基础DMEM培养基不含蛋白质、脂类或生长因子,因此培养细胞时必须添加胎牛血清(FBS)或其他无血清添加剂。其次DMEM高糖培养基通常应在2-8°C下避光保存,以避免营养成分分解。另外L-谷氨酰胺在溶液中不稳定,容易降解产生对细胞有害的氨,可选用更稳定的替代物GlutaMAX™。指示剂酚红可能会模拟雌激素效应,干扰特定激素敏感细胞的实验结果或流式细胞分析,此时应选择不含酚红的配方培养基。
DMEM高糖的研究与应用
糖尿病视网膜病变是糖尿病最常见的微血管并发症之一,视网膜毛细血管周细胞的早期丢失是DR的标志性病理特征。研究中利用DMEM高糖(含50 mmol/L葡萄糖)体外培养大鼠RMPs,观察高糖对周细胞增殖的抑制作用以及不同药物的干预效果。结果显示,与低糖DMEM空白组相比,单独使用高糖DMEM培养的对照组RMPs增殖显著受抑,证实了DMEM高糖能够模拟糖尿病视网膜病变早期的周细胞损伤[1]。
糖尿病心肌病是糖尿病的另一严重并发症,心肌纤维化是其核心病理改变。心肌成纤维细胞在DMEM高糖环境下会过度增殖并分泌大量I、III型胶原蛋白,导致心脏僵硬度增加。在这一相关研究中,DMEM高糖是诱导CFs病理改变的理想工具,可用于筛选抗心肌纤维化的药物[2]。
糖尿病还可导致骨代谢异常,如骨质疏松和牙槽骨丧失,骨髓基质细胞的成骨分化能力在高糖环境下受到抑制。在探讨淫羊藿苷对Shh通路相关基因表达的影响的研究中得出结论,DMEM高糖能够有效模拟糖尿病状态下的骨代谢抑制微环境,而淫羊藿苷通过激活Shh通路发挥保护作用[3]。
DMEM高糖作为一种基础细胞培养基,在糖尿病并发症研究中具有非常重要的地位。DMEM高糖不仅能够抑制视网膜毛细血管周细胞增殖,模拟糖尿病视网膜病变早期病理,同时可诱导心肌成纤维细胞过度增殖和胶原分泌,构建心肌纤维化体外模型,也会抑制骨髓基质细胞Shh信号通路,为糖尿病骨病研究提供工具。不同药物(PDGF-B、黄芪注射液、通心络、淫羊藿苷)在DMEM高糖环境下也展现出不同程度的保护作用,表示这些药物可能通过不同机制对抗高糖损伤。
参考文献
[1] 谢俪君, 宫晓红, 高颖, 等. 不同剂量血小板源性生长因子-B及黄芪注射液对体外高糖培养大鼠视网膜毛细血管周细胞的影响[J]. 现代中西医结合杂志, 2020, 29(27): 2979-2982,3002.
[2] 于婷, 王小梅. 通心络对高糖培养下心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中国医科大学学报, 2018, 47(2): 132-136.
[3] 李春梅, 王馨, 吴丽春, 等. 淫羊藿苷对高糖培养条件下大鼠骨髓基质细胞Shh通路的影响[J]. 中国老年学杂志, 2018, 38(13): 3214-3215.