请大家帮忙，有谁用过反转录试剂盒

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一个可能做反转录PCR的，另一个可能做实时定量荧光PCR的。反转录PCR由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”，由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成。随后，DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成，随每个循环倍增，即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解，留下互补DNA RT-PCR可能是实时PCR(real-time PCR)，属于荧光定量PCR（Q-PCR）的一种。以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。

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qiagen有体外转录试剂盒么转录的只是插入的片断，怎么会跟模板一样大呢，一般情况下应该比模板小多了。我都是跑电泳，严格来说应该跑变性的；嫌麻烦可以非变性，快速（防止rna降解）十分钟即可；抛出来的带会有两条，上面大的是模板，下面一条比较亮的是rna，那么你的转录就成功了。 pcr第一个步骤如果没记错的话应该叫“变性”， pcr的话是不需要解旋酶的，直接利用dna的高温变性特性，在高温下，使氢键断开，dna双链恢复为单链。（还有解旋酶好像是解除双螺旋的结构，是一种拓扑异构酶，对于氢键的打开没有贡献吧

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