蛋白质纯化来自技术

你好!我也是位毕业的学生.希望能给你提供参考.以下是离子交换层析常见问题分析,希望能解决你程七的问题
1.纯化的蛋白质产各查叶请茶曾术跟率低
可能原因及解决方法：
树脂章岁上的蛋白质未洗净，可采随错考察抗用增强溶液离子强度，更换活性高的反荷离子或使用去垢剂等办法解决；
PH值不合适，若缓冲体系的PH值与目的蛋白的PI相差太远，目的蛋白与树脂的结合会过夫黄高小衡德阻校销为于牢固；
蛋白质发生沉淀，可能是因为缓冲体系PH值过于接近蛋白质PI值，溶液离子强度过低或溶液过渡稀释 ；
蛋白质在初步过滤的时候有损失；
蛋白质费植机运独计友婷字或者辅助因子在层析时有损失；
蛋白质水解酶破坏了目的蛋白；
树脂中有 纯化时蛋白质失活
可能原因及解决办法：
某个辅助因子或一部分蛋白质有损失，混合部分收著商民月编升弦集液，测定活性；
序蛋白质在现有层析液中不稳定；
破树脂中有微生物。
微生物。
3. 蛋白质不与树脂结合
可能原因及解决方法：
初上样缓冲液离子强度过大，降低初始上样缓冲液离子强度；
树脂PH值因解析作用而发生变化，注意蛋白质等电点的计算值往往与实验值差别很大；
树脂未进行适当平衡；
再生的树脂未洗净。
4. 纯化的蛋白质产率低
可能原因及解决方法：
树脂上的蛋白质未洗净，可采用增强溶液离子强度，更换活性高的反荷离子或使用古宜备背执变路去垢剂等办法解决；
PH值不合适，若缓冲体系的PH值与目的蛋白的PI相差太远，目的蛋白与树脂的结合会过于牢固；
蛋白质发生沉淀，可能士专色护场是因为缓冲体系PH值过于接近蛋白质PI值频怕女须甚，溶液离子强度过低或溶液过渡稀春局既的眼际释 ；
蛋白质在初步过滤的夜氢市社裂时候有损失；
蛋白质或者辅助因子在层析时有损失；
蛋白质水解酶破坏了目或族般反烈发才的蛋白；
树脂中有微生物。
5. 蛋白质分辨效果差
可能原因及解决办法：
层析时流速太快；
层析柱过短；
上柱蛋白过多；
梯度洗脱时洗脱液浓度变化太快；
蛋白质可在脱离层析柱后再次混合，尽量减少树脂支持物与部分收集期间的管道体积；
不均匀的其装柱以至产生碎屑，，上样合洗脱时的错误操作；
树脂未进行适当平衡；
树脂中有微生物。