紫外吸收法测蛋白质含量优缺点?

网友 1

最佳答案

回答者:网友
1.蛋白质测定的Folin-酚比色法(即Lowry法)的定量范围为5~100μg蛋白质,灵敏度高;但操作要费较长时间,且Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用;不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度也稍有不同。 紫外吸收法测蛋白质含量迅速、简便、不消耗样品,低浓度盐类不干扰测定。因此,已在蛋白质和酶的生化制备中广泛采用,尤其在柱层析分离纯化中,常用280nm进行紫外检测,来判断蛋白质吸附或洗脱情况。 但该法的缺点是:(1)对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质,有一定的误差。故该法适于测定与标准

我来回答