灭菌时的过高温度常对培养基造成不良影响。如：
1.出现混浊和沉淀(天然培养基成分加热沉淀出大分子多肽聚合物；培养基中Ca、Mg、Fe、Zn、Cu、Sb等阳性离子与培养基中的可溶性磷酸盐共热沉淀)。
2.营养成份破坏或改变(酸持从按列良试度较高时淀粉、庶糖、乳糖或琼脂灭菌过程易水解;pH7.5,0.1MPa灭菌20min，葡萄糖破坏20%，麦芽糖破坏50%，若来自培养基中有磷酸盐共存，葡萄糖转变成酮糖类物质，培养液由淡黄色变成红褐色，破坏更为严重。
3.pH7.2时培养基中的葡萄糖、蛋白胨、磷酸盐在0.1MPa灭菌15min以上可产生对微生物生长的某种抑制物。
4.高压蒸汽灭菌后培养基pH下降0.1--0.3。
5.高压蒸汽灭和段延维意旧比菌的过程会增加冷凝水，降低培养基成份浓度。对于前三种不良曲财判益写蒸奏巴积系支影响，可采用低压灭菌(如在0.056MPa、30min灭菌葡萄糖溶液)，或将培养基几种成份分别灭菌，临 用前无菌混合(如磷酸盐与Ca、Mg、F互两e、Zn、Cu等阳性离子溶液)的方法，特殊情况可采用间歇灭菌、过滤普斤下院害所说操装除菌(如维生素溶液)。工业发酵中采用的连续加专屋压灭菌法(135--140摄氏度，5--15s)和连续蒸煮法。
