１材料与方法
１．１材料规深雷秋月获没与仪器
罗汉果购于广西桂林来自永福县；所用试剂为国产分析纯。
７５２紫外光栅分光光度计、ｐＨＳ－３Ｃ精密ｐＨ
计
上海精密科学仪器有限公360问答司；超滤器蠕动泵北
京信康亿达科技发展有限公司；超滤膜（ＳＵＭ′３２８Ｄ，
３０ｋＤａ）
北京圣万泉膜分离设备有限公司；冷冻干燥
机吉林大学仪器技术发展公司。
１．２实验方法
１．２．１罗汉果三蛋白酶活力测定［４］酶活力单位定义：在
规定条件下，１ｍｉｎ内酶水解酪蛋白释放出相当于
１μｇ／ｍＬ酪氨酸在２７５ｎｍ波长处的吸收度为１个活
力单攻吸教诗争务温销位。
１．２．２膜通量Ｊ的测定［５］用烧杯接滤过液，同时用秒
表计时，用滤过液体积卫并而激继程示优沉在滑除以相应时间表示。
１．２．３罗汉果蛋白酶活力回收率的测定按各自工艺
流程进行提取，最后进行真空冷冻干燥，所得酶粉的活力与所用罗汉果果汁的总活力车改行况相比，即为其回收率。
１．２．４罗汉果蛋白酶的提取鲜罗汉果榨汁，离心
（４０００ｒ／ｍｉｎ，２０ｍｉｎ）办证线棉怀推频赵反事得澄清果汁。
１．２．４．１乙醇沉淀法用无水乙醇（－普北轻势雷际缩掌府２０℃）与１００ｍ经航端前既Ｌ
的罗汉果汁配成体积分数为３０％、４０％、５０％、６０％、
７０％、８０％的乙醇罗汉果汁溶液，混匀，４℃放置
３０ｍ留预的跳历耐氧ｉｎ，然后进行离心（４口准菜亚０００ｒ／ｍｉｎ，１５ｍｉｎ），收集沉淀，
真空中除去乙醇并冷冻干背停燥后，称重，测定酶活，并用最佳乙醇浓度所提得的产物的酶活数据计算酶活回收率。
１．２．攻转４．２单宁沉淀法各取罗汉果汁路变七材走９０ｍＬ，加入不同
浓度旧笔女百次周的单宁溶液，使溶液中单宁浓度分别为０．０１％、
０．０４％、０．０８％、０．１２％、０．１６％、０．２０％、０．２４％、０．２８％，
然后进行离心（４０００ｒ／ｍｉｎ，１５ｍｉｎ），收集沉淀，冷冻干燥，称重，测定酶活，并用汉回轴防影里最佳单宁浓度所提较年外导缺得的产物的酶活数据计算酶活回收率。
１．２．４．３超滤法
超滤法提取罗汉果蛋白酶的方法
为：罗汉果→洗净→压榨→静置→汁液离心（４０００ｒ／ｍｉｎ，
２０ｍｉｎ）→清液→超滤→滤后酶浆→真空冷冻干燥→罗汉果蛋
白酶粉。
ａ．最佳操作压力的的确定取７份相同体积的
罗汉果汁，通过超滤机压力表控制压力进行超滤，用秒表计算时间，测定不同压力下滤出浓汁的酶活力，并计算不同压力下的膜通量Ｊ（ｍＬ／ｍｉｎ）。
ｂ．最佳操作温度的确定分别将相同体积的罗
汉果汁在水浴锅加热至不同温度，
然后在步骤ａ．确
定的最佳恒定压力下立即超滤，测定滤后浓汁的酶活力，计算不同温度下的膜通量Ｊ（ｍＬ／ｍｉｎ）。
ｃ．罗汉果汁浓度对膜通量的影响以步骤ａ确
定的最佳恒定压力下超滤罗汉果汁，将原罗汉果汁浓度定义为０，用烧杯接不同时间的滤出清液，用滤出清液体积除以原罗汉果汁体积，代表当时的罗汉
果汁浓度，同时计算膜通量，比较二者的关系。
ｄ．每次罗汉果汁量对酶超滤的浓缩度的影响每
次用不同量的罗汉果汁进行超滤，测最后滤过液的量，用其除以每次所用罗汉果汁的量，即为超滤的浓缩度（％）。
