用紫外光谱仪进行定量测定的原理是朗伯比尔定律，即吸光度A=摩尔吸光系数ε×比色皿厚度b×被测物浓度c。为了使测定的灵敏度最高，则应选用最大吸收波长为工作波长，这时对应的摩尔吸光系数称为最大摩尔吸光系数。①首先要知道测定方法的线性范围，即当c发生变化时，A与c成直线的范围，测定时，A与c都必须在此线性范围内；②由于读数误差的原因，吸光度常要求控制在0.2~0.8的范围内；③寻找线性范围与吸光度读数范围的交集，这样就确定了方法的吸光度范围；④根据朗伯比尔定律及上述确定的吸光度范围即可计算出c的范围（最大摩尔吸光系数、b均已知）。举个例子吧：（1）已知某紫外光度法的线性范围对应的吸光度范围为0.1~0.6，则其与吸光度读数范围0.2~0.8的交集、即公共部分为0.2~0.6；（2）若已知该方法的最大ε=2.0×10^(5)、b=1cm；（3）将0.2和0.6分别代入朗伯比尔定律可算出c分别为1×10^(-6)和3×10^(-6)（mol/L），即利用最大摩尔吸光系数估算被测物需配制的浓度范围为1×10^(-6)至3×10^(-6)（mol/L）。
