怎样构建突变的磷酸化位点

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根据以前所看的文献,磷酸化位点通常是丝氨酸和苏氨酸,可以将这些氨基酸利用定点回诱变的方式突变为丙氨酸或谷答(天冬)氨酸,从而将原有的磷酸化位点失活或持续保持活性(模拟组成型磷酸化),respectively.
另外需要注意的是,你所研究的目标蛋白往往具有多个磷酸化位点,而其中只有特定的一个或几个磷酸化位点参与你所要研究的活性,

利用重组PCR，把Ser Thr突变为Ala，表达，然后测序即可，剩下的就是常规的实验了

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