镍离子亲和起随治消己盾慢记大倒柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配？
我第一次做蛋白，请尽量说详细点我手上只有一个笔记，是这样写的平衡液：50mM 磷酸钠 300mM氯化钠洗脱液：150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有，求指点：1.平衡液只有这两种成分这么简单吗？2.洗脱液是水加咪唑还是平衡液加咪唑呢？
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回答者：网友
1. 平衡液是缓冲液，应该是PB或PBS，这个配方很多手册可以查，注意亲和层析的pH是一个比较重要的参数，会影响洗脱过程的，有一种镍柱洗脱方法就是高pH上样，低pH洗脱。
2. 洗脱液一般是平衡Buffer中加入咪唑，没有缓冲的体系有可能造成蛋白的变性。
