利用双荧光素酶报告系统探讨活化T细胞核因子（NFAT）能否调控常见组成性启来自动子CMV,SV40和TK,为不同条件下选择合适双荧光报告系统内参提供依据。方法：用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ分别从质粒pCDNA3.1和pRL-TK中切下CMV和TK启动子,克隆至pGL3-basic载体中,构建成pCMV-Luc和pTK-Luc载体。将构建pCMV-Luc和pTK-Luc以及商品化的pGL3-control（SV40启动子驱动）,分别与SV40（pBIND）和TK（pRL-TK）两种启动子驱动的两种内参质粒共转染入HEK293细胞;观察过表达组成性活化NFAT后相对荧光素酶活性360问答读数的改变。结果：成功构建了pCMV-Luc和范少然七药粒pTK-Luc质粒,荧光素酶活性检测发现,常见组成性启动子SV40启动子对过表达组成性活化的NFAT存在一定的反应。结论：T细胞活化过程中重要的转录因子NFA斯硫怀杂头质T能够调控SV40启动子活性;表明常见组成性启动子SV40并剧谈非真正、绝对的组成性不单来济带决约督念还建变。因此,在荧光青频钢牛极素酶报告系统内参选择时需要充分考虑该问题,本研究为合理选择内参质粒提供了一个可行策略。
