变性聚丙烯酰胺凝胶电泳点样怎么往上飘

我用的是6*loading buffer 5ul,PCR产物10ul怎么老往上飘啊,都做了好几回了,到底是怎么回事啊。我做的是分离核酸的胶。10%变性聚丙烯酰胺凝胶。
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回答者:网友
往上飘是什么意思?点不进胶孔?还是胶上的片段的大小偏大?如果是前者,那应该与你的胶无关,因为还没跑呢。你用的是TBE buffer吗?检查一下你的buffer,必要的话从新配一个。另外你的loading buffer 是新的吗?会不会里面的甘油量不足了?你的体系的话6X加2ul就够了,加5ul还不往下降就不对了。另外你是否经过了预电泳?如果经过了的话在上样前是需要用枪吹孔的,孔里会有预电泳出来的较高浓度尿素。还有,可以用微量注射剂(就是针,不是10ul枪)直接加样至孔底的。后者的话,检查你的PCR吧。

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