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回答者:网友
关键词:脑组织 目的:熟练进行脑组织蛋白质的提取 背景知识:无 原理:无 具体内容: 脑组织总蛋白质提取方法 1.将低温保存的样本称重。 2.来自加入裂解液。样本与组都检线据社护连别培织比例=1:3~3.5 w/v,一般为150~170mg:500μl。加入50×Coc考火ktail蛋白酶抑制剂。可利用振荡器、加样器,将组织块吹散。 3.液氮中冻融3~4次。1min/time,室温中自然360问答融化。 4.超声破碎。将含裂解液的EP tube埋入冰中,超声3~4sec/time,强度为最大强度的3/4。间隔10几sec。至溶液透明。小心空泡效应。 5.须都众鸡加入Dnase I,Rnase A。10μg/μl,5μl。4℃ 30min。 6.4℃ 14000g/min 离心25~30mins。 7.提上清,分装。保存。 细胞裂学南粮米重念眼急育的解液 Tris (40mM) 24.2mg 48.4 mg 96.8mg 尿素(urea) (7M) 2.102g 4.204g 8.408g 硫注回易氧副还用读呀拉脲(thiourea) 季急笔宣效状述亚(2M) 0.761g 1.522g 3.044g 4% CHAPS 0.2g 0.4g 0.8g 1%二硫苏糖醇(DTT) 0.05向商将气器发当g 0.1g 0.2g 乙二胺四乙酸二钠 1.86mg 3.72mg 7.44mg (EDTA快学刘) (1mM) 加去离子水至 广协情溶记守钟范规更5 ml 10 ml 20 ml