3,5-二硝基水杨酸比色法是如何对总糖进行测定的?
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通过测定波长为540nm处“标准葡萄糖浓度梯度的吸光度”和样品溶液的吸光度，绘制标准曲线，查对标准曲线并计算，便可求得样品中还原糖的含量。 3，5－二硝基水杨酸，3,5-Dinitrosalicylic acid ，简称DNS。在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质)，还原糖则被氧化成糖酸及其它产物。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度量呈一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的吸光值，查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量。
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dns法的原理是： 在碱性条件下，还原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸，而还原糖则被氧化成糖酸及其它产物。 在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度量呈一定的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的消光值，查对标准曲线可求出样品中还原糖的含量。 dns法利用的是还原糖与3,5-二硝基水杨酸发生氧化还原反应显色。所以，dns法就会先测出还原糖的含量。
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通过测定波长为540nm处“标准葡萄糖浓度梯度的吸光度”和样品溶液的吸光度，绘制标准曲线，查对标准曲线并计算，便可求得样品中还原糖的含量。
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