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DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。 因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故DNS方法适合用在多糖(如纤维素、半纤维素和淀粉等)水解产生的多种还原糖体系中。 1、实验材料 纯化的蔗糖酶 2、实验试剂 ⑴ 5%蔗糖(A.R.)溶液(W/V) ; ⑵ 0.2mol/L乙酸缓冲液,pH3.6、4.6、5.6; ⑶ 3,5-二硝基水杨酸试剂; 甲液:溶解6.9g 结晶酚于15.2ml 10%NaOH溶液中,并用水稀释至69ml,在此溶液中加6.9g亚硫酸氢钠。 乙液:称取255克酒石酸钾钠加到300ml 10%NaOH溶液中,再加入800ml 1%3,5-二硝基水杨酸溶液. 甲,乙二溶液相混合即得黄色试剂,贮于棕色瓶中备用,在室温放置7-10天以后使用。 3、实验器材与仪器 试管及试管架, 吸量管,恒温水浴箱 (37℃、50℃、65℃),可见光分光光度计。 实验方法是正交法。具体的实验方案去书上找,绝对有