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目前做多的方式星失良水书重组普固各是采用pH9.6的碳酸盐缓冲液包被,4℃过夜包被或者37℃包被2h,包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质变化来自,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的最适包被浓度需要通过实验来确定。
封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底还快吗命而谓引,不经封闭也可得到满意的结果司范。而在间接法测定中,封闭一般是必不可少的。
常用的封闭剂有0.05%-0局流历口吗导弱缺跟异.5%的BSA、10%的小牛血360问答清、1%明胶、5%的脱脂奶粉,AbMART推荐使用5%脱脂奶粉,价廉而且封闭能力强,不过5%脱脂奶粉只适合短期内使用,不宜长期保存,所以试剂盒中较少使用