福林-酚法

可以
以测定水果为例

1 材料和方法

1.1 试剂
1.1.1 药品 钨酸钠(Na2WO4·2H2O)、钼酸钠(Na2MoO4·2H2O)、硫酸锂(Li[2]sO4)、磷酸(H3PO4 85%)、磷钼酸(24MoO3-P2O5·xH2O)、碳酸钠(Na2CO3)、盐酸和溴水为分析纯。一水合没食子酸标样为Sigma-Aldrich公司产品。水为蒸馏水。
1.1.2 FC显色剂 称取50.0 g钨酸钠和12.5 g钼酸钠,用350 mL蒸馏水溶于1 000 mL回流瓶中,加入25mL磷酸和50mL盐酸,混匀,微沸回流2 h.加入75.0 g硫酸锂、25mL蒸馏水和数滴溴水,开口沸腾约15min(至溴水挥尽为止),冷却,定容至500mL,过滤。置棕色瓶中保存备用。使用时加入1倍蒸馏水稀释。1.1.3 FD显色剂称取100.0 g钨酸钠和20.0 g磷钼酸,溶于200mL蒸馏水,加入5mL磷酸。加热回流2 h,冷却,定容至lL。
1.1.4 7,5%碳酸钠溶液称取37.5 g碳酸钠,溶于250mL温水,混匀,冷却,定容至500mL。
1.1.5 一水合没食子酸标准溶液称取0.110 ***合没食子酸,用蒸馏水溶解、定容至100 mL,此溶液质量浓度为1 000 mg/L。分别吸取此溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL至100 mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,所得一水合没食子酸标准溶液的质量浓度分别为0.0、10、20、30、40、50 mg/L。

1.2 仪器

紫外分光光度计。

1.3 方法
1.3.1样品预处理将水果洗净、晾干。取可食部分切碎,组织捣碎机匀浆,备用。
1.3.2 总多酚的提取取试样适量(葡萄酒吸取2mL,葡萄和柿子称取2 g匀浆,其他水果称取5 g匀浆),用80mL蒸馏水洗人100mL容量瓶中,至100℃沸水浴中保温30min,取出,冷却,定容,过滤,滤液备用。
1.3.3测定使用5mL刻度吸管吸取1.0mL滤液(若多酚含量过高,可适当稀释)或一水合没食子酸标准溶液,分别用刻度吸管加入FC显色剂或FD显色剂及7.5%碳酸钠溶液,用蒸馏水定容至10 mL,混匀,室温显色(下同),测定765 nm吸光度,根据稀释倍数和从标准曲线中查出的浓度,计算样品多酚含量。