农杆菌质粒
转化拟南芥等用的农杆菌中,其自身含有几个质粒,大小分别是?我将PBI121为骨架的载体转入农杆菌后,提质粒大小不对,而憨範封既莩焕凤唯脯沥且有两条带。疑惑中。。。
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用PBI121的话应该是一般的双元载体系统。不知道你用的是什么农杆菌菌株,GV3101吗?农杆菌自带一个转染用的Ti质粒,但是我做的时候从没提出来过,Ti质粒应该很大的。 质粒大小不对,有两条带。不知道你做过重复没有。你如果不嫌麻烦可以重转一下农杆菌。也可以先做个酶切,看看酶切结果是不是正确。有的时候在菌里面同一个质粒的构像不憨範封既莩焕凤唯脯沥一致就会跑出两条带,不过会挨得很近。酶切之后通常大小和带数就正确了。琼脂糖电泳就是这样!
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作为工程菌的宿主,应该没有其他质粒吧?是不是菌株有问题,最好跟别人再要一个转进去再看看 你憨範封既莩焕凤唯脯沥酶切下看看大小对不对呢?
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超螺旋、开环和线状等不同构象而已。
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