我刚开始做ELISA实验，初步的实验是先包被抗原，用于检测血清抗体的滴度！能否提供一个实验方案（或实验步

1）包被抗原梯度稀释，稀释浓度需要摸索（第一次实验的话可以10倍或者5倍稀释，得到一个大致的浓度）,稀释液：碳酸盐缓冲液，pH9.6。
　　2）包被微孔反应板，每孔100ul，4度过夜。
　　3）用PBST缓冲液洗涤1遍，每孔加入1％BSA，37度1－2小时。
　　牛血清白蛋白(BSA)作为一种大分子物质，哥宪么宁伤识兴具有稳定细胞膜、抑制脂质过氧化、增溶和乳化等作用。它可能通过阻止细胞膜磷脂的过氧化或溶解磷脂使膜额高既团考水袁互买具有一定的流动性，减少膜脂在冷冻过程中的损伤；也可能通过降低液体表面张力，增宁那燃动强膜的渗透性和缓解由渗透压变化而造成的损能先测附数振伤的作用。此外，加有BSA的木防冻液具有表面活化的特击加列传我湖念性，这一特性在降温和复苏中有利于减少或降低冰晶的形成因此，对酶活性有最好的保护作用。
　　4）用PBS或生理盐水洗涤1遍，拍干即可，这样得到的反应板必须当天使用，如果需表继界非脱从教长期使用建议抽干后置干燥环境下保存。
　　5）检测标本，标本用生理盐水1：1000稀释后，加入已包被的反应板，每孔100ul，37度孵育30－60分钟。
　　6）用PBST洗涤5历皇垂次，拍干(PBST (含0.l%TritonX-100 pH 7.4))
　　7）加入用1％BSA稀释的抗人Ig训边顾阿G－HRP（如果是检测血清按玉阿呀众中的IgG），每孔件话念济互厂100ul，37度孵育30－60分钟。由于使用的稀释液比较简单，保护作用低，建议现配现用，酶标抗体的稀释浓度需摸索，先考虑购买时的推荐浓度，然后浓度下降1倍，和上升1倍。
　　8）用PBS静T洗涤5次，拍干
　　9）加入显色剂，按购得的显色剂的使用说明操作，孵育温度，时间。
　　10）加入终止液，每孔50ul
　　11）读书。不同显色剂读数波长不同。TMB 450nm，OPD492nm