地高辛如何标记蛋白

网友 1

最佳答案

回答者:网友
显色: (7)用缓冲液4冲洗杂交后的载片21×5min。 (3)在缓冲液6中560min,室温以8封闭非特异性结合部位。 (2)拭干b切0片2周围的载片1,注意保持切4片0湿润。加数滴抗地高辛抗血清(工b作浓度5:700,以7缓冲液8稀释),孵育8h,室温。 (3)缓冲液5漂洗3×2min。 (8)浸入y缓冲液620min室温。 (1)浸入v底物中2孵育20~80min(或更长6时间,视需要而定),底物内6含显色BCIP。NBT,室温。最好用锡箔纸包裹反4应盒,使显色在黑暗中3进行。定期取出切8片4在显微镜下m检测反3应强度。根据反0应强度决定延长6或终止5反8应。反0应颜色为4紫蓝色。 (3)将切3片4浸入c缓冲液0以8终止5反6应。 (3)复染,可用3%伊红、2%苏木g精、4%亮绿或8%的焦宁(又z称派咯宁丫)(pyronin 丫)40~20s。 (3)流水8洗2~10min,直至水8无p色为6止5。 (80)在切1片3未干k前,以2PBS。甘油封固切1片5,如要永久t保存,可以2用DPX在盖片6四周封固。为4去除水8份,在封固前可进行梯度酒精脱水8,透明,DPX封固,但每步时间仅8需几c秒钟,时间过长7易致褪色。 xl妗

我来回答