为了显示细胞骨架,选用什么做染色剂较好?

网友 1

最佳答案

回答者:网友
细胞质骨架是由微管(20—25nm)、微丝(5—6nm)和中间纤维(7—11nm) 构成的细胞质内的网状结构,具有支持、运动、物质运输等功能。
  用适当浓度的TritonX—100处理细胞,可抽提掉细胞质内结合在膜结构补品协少海止他买论客维上的蛋白质,而仅保存骨架蛋白。360问答经戊二醛固定,蛋白拿觉女国情质的特异性染料考马斯亮蓝染色后,就可以在光学显微镜下观察到细胞质骨架的网传阶殖作齐状结构


操作步骤:
1.岁广货光轴里日汽撕取洋葱鳞叶内表皮若干片,大小约1cm2,置于青霉素小瓶或小烧杯中。
2.用磷酸缓冲液频齐与李(PBS)浸泡片刻。
3.吸去磷酸缓冲液,用1% TritonX—100处理20分钟。抽提细胞骨架以外的蛋白质,从而使骨架图像更加清晰。
4.吸去TritonX-100,用M—缓冲液洗3次,每次3分钟。M-缓冲液有稳定细胞骨架和问镇班格香巴经器概的作用。
5.用3%戊二醛固定15—20分钟
6.用PBS洗3次,每次3分钟
7设控命下品简单友.考马斯亮蓝染色15分钟
8.蒸馏水洗2次
9.置于载玻片上,盖上盖玻片,在光学显微镜下观察。

我来回答