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.连续监测法中酶活性360问答浓度的计算
在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的历换缺改变,通过计算求出酶反杀圆应初速度的方法。
连续监测法采什的项况级植优点之一是计算方便,不需作标准曲线或标准管,用分光坐眼跟翻育跟光度计监测酶反应过程时,很容易求出反应体系中每分钟吸光度变化,根据摩尔吸太架紧减领汽边光系数可求出△A(相当测定物质材布听求既变化的微摩尔数)。
计算中要考虑标本的稀释倍数,还应考虑光径不同时对△A的影响。
图片1
ε为微摩尔(线性)吸光体系
△A为吸光度变化
ν为标本体积(ml)
V为反应体系体积(ml)
L为光径(cm)
后面几项皆为常数,叫做酶活力浓度测定转化因子:
图许绍主试案厚交及片2
2.常数K值设置
在测酶时,常数K值的选择是很重要的。
比值过高虽然测定的线性范围较宽,但重复性差。反之,虽然精密度好,但线性窄。
K值设置的首发点应是测定酶的判断值或参考值上限,应保证这些值测定的可靠。
3.临床酶催化活性浓度测定的校准
由于临床酶催化活性浓度测定受测定方法和条件的影响,国际医学检验量值溯源委员会推荐了常用酶测定的参考方法。采用与仪器和试剂相配套的有溯源校准的校正测定系统,是发展趋势