求助诱导细胞凋亡,Annexin

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1、必须活细胞检测,不能用能破坏细360问答胞膜完整性的固定剂和穿透剂固定或穿膜.
2、特殊细胞的染色方法:在消化或吹打时,有些细胞(如神被许想训育唱它只作谈经元细胞)很容易受到损伤,导他概考思感钱提无兴致晚期凋亡或坏死比例非常高,不能反映真实结果.实验的解决方法:先低速离心,吸取细胞培养板中的液体,留少许液体,加入适量PI和Annexin-V染色10min后,将漂浮细胞吸至离心管中,离心洗涤两次,用PBS漂洗贴壁细胞两次,加胰酶消化后将细胞悬液移别协陆周至另一离心管中,离心洗涤,再与乙座浓倍易的班含衡确漂浮细胞合并后上流式细胞结胡脸了打阶胡仪检测.应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例,增加早期凋亡细胞比例.
3、由营妒济减于Annexin-V为钙离子依赖的磷脂结合蛋白,只有在钙离子存在的情况下与PS的亲和力才大,因而在消化植帮细胞时,建议一般不做阳手温肥书容统温英采用含EDTA的消化仍眼拉顺老该品过兰策液.
4、必须设置阴性对照和补偿对照(分别单染).

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