在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase

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一般两种办法,首先是每50ul体系中加入2ul 0.5M的EDTA然后80度水浴2分钟。另外一种是将50ul体系稀释到100ul然后加入等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)混匀后12000rpm室温离心5min转上清,然后再加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),混匀后12000rpm室温离心5min,转上清。在上清中加入10ul 3M的醋酸钠和250ul冷乙醇,-70度放置20min。4度12000rpm离心10min,弃上清。70%冷乙醇洗涤1次,然后干燥。最后沉淀用RNase free 的水溶解。个人建议用第一种方法,第二种方法太耗时间而且RNA回收率也低。

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