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如何构建含tag书的基因质粒,用抗tag的磁珠分离蛋白?谢谢
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1
最佳答案
回答者:网友
1. 把
干兴层史室李格稳
你所要Tag(比如HIS) 的编码序列和你所要的蛋白序列放到同一个阅读框,克隆到表达质粒。至于Tag是放在N
端还是C端,取决于你蛋白的性
质。
2. 转染Ecoli。表达蛋白
3. 将抗Tag
的抗体结合到专门的磁珠表面
4. 粉碎Ecoli,离心后取上清. 和结合有抗体的磁珠一起孵育。在通过磁场。最
后得到的磁珠,破坏抗原抗体
结合,就可以得到带有Tag的蛋白了。
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