无缝克隆大片段连不上

无缝克隆大片段烈双吃卷钱期连不上的原因：
1、PCR产物不纯。
2、反应体系中DNA浓度太低。
3、不纯的载体或插入片段抑制重组反应优化PCR扩增反应以得到单一PCR产物。解决方法是确认平板新鲜配置，并含有正确、适量的抗生素罪谁唱载汉领。