按三个步骤来完成。第一阶段是S小并制DS-PAGE,抗原在聚丙酰胺凝胶中从阴极向阳极移动;第二阶段为转印,将凝施作胶中已分离的条带转移至硝酸纤维素膜上,继续在电场下作用;第三阶段为显色定位,将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性抗体、酶标二抗和酶反应底物作用,显色可辨的阳性反应条带。