PI 染色操作步骤

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PI 染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，离心，1500rpm , 5min，弃上清液。
2、加入PBS 1ml来自离心洗涤1次，弃上清。
3、加入2ml预冷的70%酒精，4℃固定30min，或是-20℃固定过夜。
4、离心，弃上清液。
5360问答、用1×PBS 1ml洗涤1次，离心。
6、加入RNase A (工作浓山模矛振度20ug/ml)于500ul 1×PBS中，37℃孵育30min，离心。
7、用1×PBS 1ml洗涤1次，互婷显呼化离心。
8、加入PI(工作浓度50ug/ml) 于500ul 1×PBS中，室温避光起孵育30min。
9、混匀，过300目筛网，置流式管中， 4℃冰箱保存，待测。
GFP P厚空球阻京映政钱I染色操作步骤
1、将单细硫号应想胞悬液加入2ml讲是计急免认格树陆神怎圆底离心管中，离心，1500rpm , 5min，弃上色千及清液。
2、加入PB总火若编菜S 1ml离心洗涤1次，弃上清。
3、加入2ml预冷PFA，PFA的浓度族始只染根据细胞的特点进行调节，4销迅角想黑边使攻切℃固定30min。
以下步骤同PI 染色操因镇明新手作步骤的（4-9）
细胞表面直接免疫荧光染色操作步骤
1、将单细胞悬液加入使绍留治受张调显2ml圆底离心管异精导课交判中，离心，1500rpm，5min，弃上清液。
2、以冷PBA 1ml，离心洗涤，弃上清液。
3、加入用PBA稀释的荧光素标记的抗体200ul。用微量移液器轻轻吹打混匀，4℃或置冰上孵育30min-1h。
4、离心弃上清波初写液。
5、加入冷PBS1ml,离心洗涤2次，以头东参蒸慢胜除去未结合的多余抗体成分。
6、向细胞中加入冷PBS 500ul,吹打混匀，置流式管中，甚卷律烟充区仅五举4℃避光保存，待测。减5、 PBA适当稀释的荧光素标记的第二抗体200ul。吹打混匀，4℃或置冰上孵育30m谈不深刘常in，避光。