简述下一代测序技术原理如下:
一代测序仪利用Sanger测序——双脱氧末端终止法的原理,将被荧光标记的ddNTP掺入到dNTP中,由于收ddNTP随机掺入,PCR产物从引物之后的第一个碱基开始,
每一个位置都有可能是ddNTP。由于ddNTP缺乏链延来自伸所需要的3'-OH,链的延伸就选择性地360问答在G、A、T或C处终止。这样的易PCR产物与普通PCR不一样,不能形成一条电泳带,而是一组长度相差一个碱基的成百上千种片段蒸肉浓成该适。
1 、应用范围:
① De Novo测序
② 重测序: 如突变检测、SNPs、给改别犯随候川限止孩督插入、缺失、克隆产物验证、比井财克击较基因组
③ 分型: 如微生物和真菌鉴定、HLA分型、病毒分型
④ 其它: 如甲基化分析(重亚硫酸盐测序)和SAGE(基因表达串联分析)除娘x等风除什实误方法
2. 临床应用
肿瘤突变基因的检测和肿瘤个体化治疗