测试羟基自由基的方法:
1、自旋捕捉—ESR法
电子自旋共振法(ESR,Electron Spin Resonance)也称为电子顺磁共振(EPR,Electron Paramagnetic Resonance),是一种能直接检测和辨认自由基的方法,其测定过程需与被测自由基的产生同步进行,故对样品的制备及检测操作有很大的限制.自旋捕捉技术(Spin Trapping)利用适当的自旋捕捉剂与活泼的短寿命自由基结合,生成相对稳定的自旋加合物,根据自旋加合物的ESR谱图波谱参数,可推断原来活泼自由基的结构等.
2、高效液相色谱法
高效液相色谱法(HPLC,High Performance Liquid Chromatography)可用于间接测定自由基.测定过程中必须先选择合适的化合物捕集被测体系中的自由基,使之生成具有一定稳定性,且能被液相色谱分离与检测的产物,然后用HPLC进行测定.
2.1、采用二甲基亚砜捕集羟基自由基的HPLC测定方法.
2.2、采用水杨酸捕集羟基自由基的HPLC测定方法
3、分光光度法
在难以采用ESR、HPLC等测试手段的情况下,用分光光度法测定HO·被认为是简便实用的方法.由于HO·本身不能由分光光度法检测,因此需先选择合适的化合物与HO·反应,生成在紫外—可见光区内能产生特征吸收的产物.
4、荧光分析法