用什么方法分离来自细胞器

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细胞器的分离主志志未医世收肥装浓要用到的是离心技术。主要用到:

(一)、差速离心(differential centr造沿存材ifugation)
在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。

在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:核、专绍体线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。

由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,而且某些慢沉降颗粒常常被快战相两史度沉降颗粒裹到沉淀块中,一般重复2~3次效果会好一些血宜深异呼

差速离心只用于分离大小悬殊的村烧提只丰落晚跟细胞,更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离,常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。

(二)、密度梯度离心(density gradient centrifugation)
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将同盾聚关编紧亮冷花设细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种(图2-23)。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。分离活细胞的介质要求:1)能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高;2)PH中性或易调为中性;3)浓度大时渗透压不大;4)对细胞无毒。

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